大鼠真皮毛乳頭細(xì)胞
產(chǎn)品信息:

英文名稱:Rat Dermal Hair Papilla Cells
組織來(lái)源:毛囊
默認(rèn)種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠真皮毛乳頭采用膠原酶-混合消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠真皮毛乳頭經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠真皮毛乳頭細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 毛囊 |
英文名稱 | Rat Dermal Hair Papilla Cells | 貨號(hào) | A01X1660 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠真皮毛乳頭分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭,中心是一根毛發(fā),立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開(kāi)口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成,除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭(毛乳頭)外,毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來(lái)。真皮毛乳頭細(xì)胞位于毛囊基底部,是一類成纖維細(xì)胞。在毛囊發(fā)育早期,真皮細(xì)胞向單層上皮細(xì)胞發(fā)出真皮信號(hào),刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細(xì)胞向下方的真皮發(fā)出表皮信號(hào),誘導(dǎo)其形成有成纖維細(xì)胞組成的凝集細(xì)胞團(tuán)。在此過(guò)程中,毛母質(zhì)細(xì)胞逐漸包裹凝集細(xì)胞團(tuán),形成成熟的真皮毛乳頭細(xì)胞。作為毛囊中的重要細(xì)胞群,真皮毛乳頭細(xì)胞的分子機(jī)制和臨床應(yīng)用正在被逐漸認(rèn)識(shí)和解析。
培養(yǎng)信息:

包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠真皮毛乳頭體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)操作:

消化培養(yǎng)法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、膠原酶)將組織分散成單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán),形成細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng),細(xì)胞生長(zhǎng)較快。
取材與剪切
同樣在無(wú)菌條件下獲取組織,并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊(約 1 mm3),以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中,加入適量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘,期間可適當(dāng)搖動(dòng)或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察,當(dāng)組織分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞時(shí),立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
將細(xì)胞懸液通過(guò)篩網(wǎng)過(guò)濾,除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘,棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),并調(diào)整細(xì)胞密度至實(shí)驗(yàn)所需濃度(例如 5×10 cells/mL)。
將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中,放入 37℃、5% CO 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
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實(shí)驗(yàn)注意點(diǎn):
代數(shù)控制:盡量在低代數(shù)(如P3-P10)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),以防止因傳代過(guò)多導(dǎo)致的遺傳漂移或功能衰退。
操作輕柔:原代細(xì)胞對(duì)環(huán)境變化敏感,解凍和傳代時(shí)需格外小心,避免機(jī)械損傷。
營(yíng)養(yǎng)需求:它們往往需要更復(fù)雜的營(yíng)養(yǎng)成分(如特定的生長(zhǎng)因子、血清),普通的培養(yǎng)基可能無(wú)法滿足其生長(zhǎng)需求。
關(guān)鍵字: 大鼠真皮毛乳頭細(xì)胞;毛囊;貼壁;
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