商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 大腸桿菌表達(dá)宿主菌Rosetta 2(DE3) | 貨號(hào) | PJZ780 |
英文名稱 | Rosetta 2(DE3) | 規(guī)格 | 凍干粉；斜面；菌液；平板 |
產(chǎn)品描述：
大腸桿菌表達(dá)宿主菌Rosetta 2(DE3)是大腸桿菌的一種，是蛋白質(zhì)表達(dá)中常用的宿主菌。它攜帶T7 RNA聚合酶基因，可在IPTG誘導(dǎo)下高效表達(dá)目的蛋白質(zhì)。該菌株還攜帶稀有密碼子tRNA基因，可提高含有稀有密碼子的蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。在蛋白質(zhì)工程和生物技術(shù)研究中具有重要應(yīng)用價(jià)值。
培養(yǎng)基 酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，瓊脂：15.0，氯霉素：50mcg/mL，pH：7.0(25℃)
生長(zhǎng)條件 37℃；18-24h；好氧；
存儲(chǔ)條件 2-8℃
安全等級(jí) 1
形態(tài) 菌落形態(tài)： 大小：1-2mm 形狀：圓形 邊緣：整齊 透明度：不透明 顏色：灰白色 隆起度：扁平 表面：明亮光滑 質(zhì)地：濕潤(rùn)易挑起
模式菌株 未知
操作步驟 ①準(zhǔn)備1支含有5~10mL液體培養(yǎng)基的試管和2個(gè)平板；②安全柜中打開，用酒精燈灼燒頂部，后迅速滴上無(wú)菌水使之破裂，隨后用鑷子將其敲碎；③吸取0.5mL液體培養(yǎng)基打入凍干管，充分溶解后重新打回液體試管中，混勻；④吸取0.2mL菌懸液打入平板中，涂布均勻，重復(fù)兩次獲得兩個(gè)平板；⑤將液體試管和平板全部置于上述培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，菌種長(zhǎng)出即可使用。
應(yīng)用領(lǐng)域 科研
共享方式 公益性共享
接種與培養(yǎng)：
1. 接種方法
液體培養(yǎng)基：將菌懸液或菌苔接種至液體試管中，傾斜試管輕輕晃動(dòng)使菌液混勻。
固體平板：
涂布法：吸取 100-200 μL 菌液滴在平板表面，用無(wú)菌涂布棒涂布均勻。
劃線法：用接種環(huán)蘸取菌液，在平板表面進(jìn)行分區(qū)劃線，以獲得單菌落。
2. 培養(yǎng)條件
好氧菌：直接放入普通恒溫培養(yǎng)箱。
兼性厭氧菌：可放入普通培養(yǎng)箱，或根據(jù)需要放入?yún)捬醐h(huán)境。
嚴(yán)格厭氧菌：必須立即放入?yún)捬豕?/span>/厭氧工作站，并放入?yún)捬醍a(chǎn)氣包和指示劑。
溫度與時(shí)間：通常為 37℃，培養(yǎng) 18-72小時(shí)（視菌種生長(zhǎng)速度而定）。
菌種開啟與復(fù)蘇流程:
1. 提前準(zhǔn)備（10分鐘搞定）
把凍存管從液氮/超低溫冰箱拿出，直接放進(jìn)37℃水浴鍋，手捏住管身輕輕晃動(dòng)，1分鐘內(nèi)讓冰塊完全融化
同時(shí)準(zhǔn)備好裝有5ml液體培養(yǎng)基的無(wú)菌試管，不用提前預(yù)熱
2. 快速接種（全程無(wú)菌操作）
用移液槍吸取融化后的菌液0.2ml，直接打進(jìn)準(zhǔn)備好的液體培養(yǎng)基試管里
擰緊試管蓋，輕輕顛倒混勻3次
3. 復(fù)蘇培養(yǎng)
把試管放進(jìn)37℃搖床，設(shè)置轉(zhuǎn)速180rpm，培養(yǎng)8-12小時(shí)即可觀察菌液渾濁度，判斷是否復(fù)蘇成功
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關(guān)鍵字： 大腸桿菌表達(dá)宿主菌Rosetta 2(D;科研菌種;菌種;
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