兔胃黏膜上皮細(xì)胞

產(chǎn)品信息：

英文名稱：Rabbit Gastric Mucosal Epithelial Cells

組織來源：胃

默認(rèn)種屬 兔

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

 方法簡介 實驗室分離的兔胃黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測  實驗室分離的兔胃黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

細(xì)胞簡介：

兔胃黏膜上皮分離自胃黏膜組織；胃黏膜柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞，充盈時變平坦。幽門處的黏膜形成環(huán)形皺襞，突向腔內(nèi)稱幽門瓣。胃黏膜可分為三層，即上皮層（單層柱狀上皮）、固有層（由結(jié)締組織構(gòu)成、含有大量的胃腺）和黏膜肌層（為薄層平滑肌、排列成內(nèi)環(huán)外縱）。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層，細(xì)胞為單層柱狀上皮，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋白酶對胃黏膜的損害。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子、藥物、激素對細(xì)胞的損傷、保護和功能調(diào)控提供了簡單而的模型。

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔胃黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

消化培養(yǎng)法

此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個細(xì)胞或細(xì)胞團，形成細(xì)胞懸液進行培養(yǎng)，細(xì)胞生長較快。

取材與剪切

同樣在無菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。

將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。

酶消化

將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。

在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當(dāng)搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當(dāng)組織分散成細(xì)胞團或單個細(xì)胞時，立即終止消化。

終止與洗滌

加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。

將細(xì)胞懸液通過篩網(wǎng)過濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。

接種與培養(yǎng)

用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，進行細(xì)胞計數(shù)，并調(diào)整細(xì)胞密度至實驗所需濃度（例如 5×10 cells/mL）。

將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

盡管價值巨大，但原代細(xì)胞的研究和應(yīng)用也面臨著顯著的挑戰(zhàn)：

獲取困難：需要從新鮮組織中分離，對取材時間（通常在4-6小時的黃金窗口期內(nèi)）、無菌操作和組織活性都有極高要求。

培養(yǎng)苛刻：原代細(xì)胞非常脆弱，需要特定的、成分復(fù)雜的培養(yǎng)基和生長因子，對培養(yǎng)環(huán)境（如溫度、pH值）極為敏感。

批次差異：由于來源于不同的供體，不同批次的細(xì)胞在遺傳背景和生理狀態(tài)上存在固有差異，這給實驗的可重復(fù)性帶來了挑戰(zhàn)。

成本高昂：從獲取、分離到培養(yǎng)，整個過程耗時、費力且昂貴。