兔肝實質(zhì)細胞
產(chǎn)品信息:

英文名稱:Rabbit Hepatic Parenchymal Cells
組織來源:肝臟
默認種屬 兔
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介 實驗室分離的兔肝實質(zhì)采用混合酶灌流消化、反復低速離心制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔肝實質(zhì)經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔肝實質(zhì)細胞 | 組織來源 | 肝臟 |
英文名稱 | Rabbit Hepatic Parenchymal Cells | 貨號 | A01X2061 |
細胞簡介:

兔肝實質(zhì)分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細胞是指具有肝功能的單位,是肝臟的基本組成單位之一。肝實質(zhì)細胞與主要病生理變化:急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實質(zhì)細胞屬于中高度分化細胞,生長營養(yǎng)需求高,在體外存活時間短;細胞呈圓形或多角形,核大而圓,居中,常染色質(zhì)豐富,部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官,在整個物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。
培養(yǎng)信息:

包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1代,不建議傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔肝實質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)操作:

消化培養(yǎng)法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、膠原酶)將組織分散成單個細胞或細胞團,形成細胞懸液進行培養(yǎng),細胞生長較快。
取材與剪切
同樣在無菌條件下獲取組織,并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊(約 1 mm3),以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中,加入適量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘,期間可適當搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察,當組織分散成細胞團或單個細胞時,立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
將細胞懸液通過篩網(wǎng)過濾,除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘,棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細胞沉淀,進行細胞計數(shù),并調(diào)整細胞密度至實驗所需濃度(例如 5×10 cells/mL)。
將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中,放入 37℃、5% CO 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
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獲取與培養(yǎng)的挑戰(zhàn):
盡管價值巨大,但原代細胞的研究和應用也面臨著顯著的挑戰(zhàn):
獲取困難:需要從新鮮組織中分離,對取材時間(通常在4-6小時的黃金窗口期內(nèi))、無菌操作和組織活性都有極高要求。
培養(yǎng)苛刻:原代細胞非常脆弱,需要特定的、成分復雜的培養(yǎng)基和生長因子,對培養(yǎng)環(huán)境(如溫度、pH值)極為敏感。
批次差異:由于來源于不同的供體,不同批次的細胞在遺傳背景和生理狀態(tài)上存在固有差異,這給實驗的可重復性帶來了挑戰(zhàn)。
成本高昂:從獲取、分離到培養(yǎng),整個過程耗時、費力且昂貴。
關(guān)鍵字: 兔肝實質(zhì)細胞;肝臟;貼壁;
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