兔膀胱平滑肌細胞
產品信息：
英文名稱 | Rabbit Bladder Smooth Muscle Cells | 種屬 | 兔 |
產品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 貨號 | A01X2086 |
組織來源 | 膀胱組織 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介：
兔膀胱平滑肌分離自膀胱組織；膀胱是主要由平滑肌細胞組成的中空器官，膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細胞表型的調控和可誘導一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關，包括膀胱功能障礙。研究表明，組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖，膀胱平滑肌細胞的分化依賴于膀胱上皮細胞釋放的因子。膀胱平滑肌細胞外基質的分泌表型可通過細胞所經歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑，因此，了解在疾病發(fā)生及持續(xù)過程中平滑肌怎樣變化，這是治療方法取得進展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成，由內而外為黏膜層、肌層和外膜。其中，肌層主要由平滑肌構成。膀胱平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。體外培養(yǎng)膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基礎與前提。
方法簡介 公司實驗室分離的兔膀胱平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測 公司實驗室分離的兔膀胱平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
與細胞系的主要區(qū)別：
特征 原代細胞 永生化細胞系 (如HeLa細胞)
來源 直接從生物體組織分離 通常經過基因改造或來源于癌組織
壽命 有限，受海弗利克極限限制 無限，可無限增殖（永生化）
遺傳背景 穩(wěn)定，保留供體特征 不穩(wěn)定，易發(fā)生遺傳漂變
生理相關性 高，更接近體內真實情況 較低，可能丟失組織特異性特征
培養(yǎng)難度 高，對培養(yǎng)條件要求苛刻 低，易于培養(yǎng)和維持
公司正在出售的產品：
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大鼠頸靜脈內皮細胞 | Rat primary aortic arch endothelial cells |
細胞培養(yǎng)操作
消化培養(yǎng)法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個細胞或細胞團，形成細胞懸液進行培養(yǎng)，細胞生長較快。
取材與剪切
同樣在無菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當組織分散成細胞團或單個細胞時，立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
將細胞懸液通過篩網過濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細胞沉淀，進行細胞計數(shù)，并調整細胞密度至實驗所需濃度（例如 5×10 cells/mL）。
將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
關鍵字： 兔膀胱平滑肌細胞;膀胱組織;貼壁;
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