兔睪丸間質細胞
產品信息：
英文名稱 | Rabbit Testicular Mesenchymal Cells | 種屬 | 兔 |
產品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 貨號 | A01X2127 |
組織來源 | 睪丸 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介：
兔睪丸間質分離自睪丸組織；睪丸間質細胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈圓形，橢圓形或不規(guī)則形，胞體較大，直徑約20μm，胞質呈嗜酸性，細胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央，染色較淡，有1-2個核仁線粒體多，呈管嵴狀，無分泌顆粒。從青春期開始，睪丸間質細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質細胞刺激素（黃體生成素）的作用，能合成分泌雄性激素，可促進的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育，以及維持性征和性功能。
方法簡介 實驗室分離的兔睪丸間質采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測 實驗室分離的兔睪丸間質經3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔睪丸間質體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
與細胞系的主要區(qū)別：
特征 原代細胞 永生化細胞系 (如HeLa細胞)
來源 直接從生物體組織分離 通常經過基因改造或來源于癌組織
壽命 有限，受海弗利克極限限制 無限，可無限增殖（永生化）
遺傳背景 穩(wěn)定，保留供體特征 不穩(wěn)定，易發(fā)生遺傳漂變
生理相關性 高，更接近體內真實情況 較低，可能丟失組織特異性特征
培養(yǎng)難度 高，對培養(yǎng)條件要求苛刻 低，易于培養(yǎng)和維持
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細胞培養(yǎng)操作
消化培養(yǎng)法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個細胞或細胞團，形成細胞懸液進行培養(yǎng)，細胞生長較快。
取材與剪切
同樣在無菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當組織分散成細胞團或單個細胞時，立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
將細胞懸液通過篩網過濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細胞沉淀，進行細胞計數，并調整細胞密度至實驗所需濃度（例如 5×10 cells/mL）。
將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
關鍵字： 兔睪丸間質細胞;睪丸;貼壁;
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