兔附睪上皮細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
兔附睪上皮分離自附睪組織；附睪（Epididymis）是一個(gè)由曲折、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官，一端接著輸精管（Ductusdeferens），一端接著睪丸（Testis）的曲細(xì)精管，具體結(jié)構(gòu)主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣，可分為頭、體、尾三部。精子離開(kāi)睪丸后通過(guò)輸出小管進(jìn)入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營(yíng)養(yǎng)精子的功能，以促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟附睪的功能是暫存精子，促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟。精子在附睪內(nèi)獲得運(yùn)動(dòng)能力，總共停留8～17天，終達(dá)到功能上的成熟。在這個(gè)過(guò)程中，精子除了自身的因素，還受到附睪微環(huán)境的影響，這包括了一系列的物理、化學(xué)變化和精子形態(tài)的改變?？梢哉f(shuō)，附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發(fā)生異常，精子則不能成熟，引起不育。附睪上皮含有主細(xì)胞、基細(xì)胞、亮細(xì)胞等幾種類型細(xì)胞?；?xì)胞，其頂部離附睪管腔有一定距離，在附睪各部分，其形態(tài)沒(méi)有差別，一般認(rèn)為是貯備細(xì)胞；另一種主細(xì)胞，是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ)，在各區(qū)段的主細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)差別很大，這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異。除上皮細(xì)胞外，附睪的管壁組織結(jié)構(gòu)也有規(guī)律性的變化，附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮，而尾部平滑肌就沒(méi)有這種特點(diǎn)，僅在射精一瞬間出現(xiàn)強(qiáng)烈的節(jié)律收縮。作為負(fù)責(zé)提供適合精子成熟微環(huán)境的附睪，具有活躍的分泌與吸收功能。其中，附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉(zhuǎn)運(yùn)，對(duì)保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和酸堿度，為精子成熟提供適宜的環(huán)境起著相當(dāng)重要的作用。睪丸的支持細(xì)胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液，如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液，而從附睪排出的只不過(guò)幾百微升，也就是說(shuō)睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內(nèi)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，結(jié)扎輸精管時(shí)睪丸不會(huì)腫脹，但若結(jié)扎睪丸輸出小管，睪丸天就會(huì)腫脹，這就充分證實(shí)了附睪存在著強(qiáng)有力的吸收功能，但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細(xì)胞對(duì)精子的發(fā)育、成熟，，附睪生理基礎(chǔ)功能研究具有重要意義。
產(chǎn)品名稱 | 兔附睪上皮細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 附睪 |
英文名稱 | Rabbit Epididymal Epithelial Cells | 貨號(hào) | A01X2134 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
英文名稱：Rabbit Epididymal Epithelial Cells
組織來(lái)源：附睪
默認(rèn)種屬 兔
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的兔附睪上皮采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的兔附睪上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔附睪上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)操作：
消化培養(yǎng)法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)，形成細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞生長(zhǎng)較快。
取材與剪切
同樣在無(wú)菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當(dāng)搖動(dòng)或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當(dāng)組織分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞時(shí)，立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
將細(xì)胞懸液通過(guò)篩網(wǎng)過(guò)濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，并調(diào)整細(xì)胞密度至實(shí)驗(yàn)所需濃度（例如 5×10 cells/mL）。
將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
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獲取與培養(yǎng)的挑戰(zhàn)：
盡管價(jià)值巨大，但原代細(xì)胞的研究和應(yīng)用也面臨著顯著的挑戰(zhàn)：
獲取困難：需要從新鮮組織中分離，對(duì)取材時(shí)間（通常在4-6小時(shí)的黃金窗口期內(nèi)）、無(wú)菌操作和組織活性都有極高要求。
培養(yǎng)苛刻：原代細(xì)胞非常脆弱，需要特定的、成分復(fù)雜的培養(yǎng)基和生長(zhǎng)因子，對(duì)培養(yǎng)環(huán)境（如溫度、pH值）極為敏感。
批次差異：由于來(lái)源于不同的供體，不同批次的細(xì)胞在遺傳背景和生理狀態(tài)上存在固有差異，這給實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性帶來(lái)了挑戰(zhàn)。
成本高昂：從獲取、分離到培養(yǎng)，整個(gè)過(guò)程耗時(shí)、費(fèi)力且昂貴。
關(guān)鍵字： 兔附睪上皮細(xì)胞;附睪;貼壁;
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