兔附睪上皮細胞
產(chǎn)品信息:

兔附睪上皮分離自附睪組織;附睪(Epididymis)是一個由曲折、細小的管子構(gòu)成的器官,一端接著輸精管(Ductusdeferens),一端接著睪丸(Testis)的曲細精管,具體結(jié)構(gòu)主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣,可分為頭、體、尾三部。精子離開睪丸后通過輸出小管進入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養(yǎng)精子的功能,以促進精子的進一步成熟附睪的功能是暫存精子,促進精子的進一步成熟。精子在附睪內(nèi)獲得運動能力,總共停留8~17天,終達到功能上的成熟。在這個過程中,精子除了自身的因素,還受到附睪微環(huán)境的影響,這包括了一系列的物理、化學(xué)變化和精子形態(tài)的改變??梢哉f,附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發(fā)生異常,精子則不能成熟,引起不育。附睪上皮含有主細胞、基細胞、亮細胞等幾種類型細胞?;毎?,其頂部離附睪管腔有一定距離,在附睪各部分,其形態(tài)沒有差別,一般認為是貯備細胞;另一種主細胞,是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ),在各區(qū)段的主細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)差別很大,這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異。除上皮細胞外,附睪的管壁組織結(jié)構(gòu)也有規(guī)律性的變化,附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮,而尾部平滑肌就沒有這種特點,僅在射精一瞬間出現(xiàn)強烈的節(jié)律收縮。作為負責提供適合精子成熟微環(huán)境的附睪,具有活躍的分泌與吸收功能。其中,附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉(zhuǎn)運,對保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和酸堿度,為精子成熟提供適宜的環(huán)境起著相當重要的作用。睪丸的支持細胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液,如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液,而從附睪排出的只不過幾百微升,也就是說睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內(nèi)。動物實驗表明,結(jié)扎輸精管時睪丸不會腫脹,但若結(jié)扎睪丸輸出小管,睪丸天就會腫脹,這就充分證實了附睪存在著強有力的吸收功能,但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細胞對精子的發(fā)育、成熟,,附睪生理基礎(chǔ)功能研究具有重要意義。
產(chǎn)品名稱 | 兔附睪上皮細胞 | 組織來源 | 附睪 |
英文名稱 | Rabbit Epididymal Epithelial Cells | 貨號 | A01X2134 |
細胞簡介:

英文名稱:Rabbit Epididymal Epithelial Cells
組織來源:附睪
默認種屬 兔
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介 實驗室分離的兔附睪上皮采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔附睪上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔附睪上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)操作:

消化培養(yǎng)法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、膠原酶)將組織分散成單個細胞或細胞團,形成細胞懸液進行培養(yǎng),細胞生長較快。
取材與剪切
同樣在無菌條件下獲取組織,并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊(約 1 mm3),以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中,加入適量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘,期間可適當搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察,當組織分散成細胞團或單個細胞時,立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
將細胞懸液通過篩網(wǎng)過濾,除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘,棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細胞沉淀,進行細胞計數(shù),并調(diào)整細胞密度至實驗所需濃度(例如 5×10 cells/mL)。
將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中,放入 37℃、5% CO 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
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獲取與培養(yǎng)的挑戰(zhàn):

盡管價值巨大,但原代細胞的研究和應(yīng)用也面臨著顯著的挑戰(zhàn):
獲取困難:需要從新鮮組織中分離,對取材時間(通常在4-6小時的黃金窗口期內(nèi))、無菌操作和組織活性都有極高要求。
培養(yǎng)苛刻:原代細胞非常脆弱,需要特定的、成分復(fù)雜的培養(yǎng)基和生長因子,對培養(yǎng)環(huán)境(如溫度、pH值)極為敏感。
批次差異:由于來源于不同的供體,不同批次的細胞在遺傳背景和生理狀態(tài)上存在固有差異,這給實驗的可重復(fù)性帶來了挑戰(zhàn)。
成本高昂:從獲取、分離到培養(yǎng),整個過程耗時、費力且昂貴。
關(guān)鍵字: 兔附睪上皮細胞;附睪;貼壁;
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