IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細胞專用培養(yǎng)基

商品屬性：

產(chǎn)品介紹：

IEC-6細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持IEC-6細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 IEC-6 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于IEC-6細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM（含NaHCO3 1.5g/L）培養(yǎng)基               445 ml

特級胎牛血清     50 ml

P/S青霉素-鏈霉素    5 ml

牛胰島素         0.01mg/ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存1個月；-20℃，避光，保存3個月。
質量控制

實驗原理：

以DMEM高糖培養(yǎng)基為基礎，添加10%優(yōu)質胎牛血清和1%抗生素，模擬大鼠小腸隱窩上皮細胞的生長環(huán)境，為IEC-6細胞提供充足的營養(yǎng)物質和能量，支持細胞的貼壁生長和增殖，維持細胞的小腸上皮細胞特性，用于腸道疾病的研究和藥物篩選。
操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
使用方法：

（一）常規(guī)使用步驟

培養(yǎng)基從 2~8℃取出，37℃水浴預熱 15~20min，避免冷刺激細胞。

超凈臺內用 75% 酒精擦拭培養(yǎng)基瓶身，無菌操作開封。

吸棄培養(yǎng)瓶中舊培養(yǎng)基，加入預熱的專用培養(yǎng)基（T25 瓶加 5~6mL，T75 瓶加 12~15mL）。

置于37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

（二）細胞復蘇

液氮取出凍存管，37℃快速融化（1~2min），75% 酒精消毒后轉入超凈臺。

細胞懸液轉移至含 5mL 預熱專用培養(yǎng)基的 15mL 離心管，1000rpm（200g）離心 3min，棄上清。

加 5mL 專用培養(yǎng)基重懸，轉入 T25 培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)，次日換液去除死細胞。

（三）細胞傳代（80~90% 匯合度）

吸棄舊培養(yǎng)基，無菌 PBS（無 Ca2?/Mg2?）洗細胞 1~2 次，吸棄 PBS。

T25 瓶加 1mL 0.25% 胰酶 - EDTA，37℃消化1~3min，顯微鏡下見細胞變圓、間隙增大即終止。

加 3~4mL 專用培養(yǎng)基終止消化，輕柔吹打至單細胞懸液，1000rpm 離心 3min，棄上清。

專用培養(yǎng)基重懸，按1:3~1:4分瓶，補足培養(yǎng)基后 37℃培養(yǎng)。

（四）細胞凍存

傳代步驟收集細胞，離心棄上清。

凍存液（90%FBS+10%DMSO）重懸，密度1~3×10?細胞 / 管。

分裝入凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜，次日轉入液氮長期保存。
公司正在出售的產(chǎn)品：