KG-1人急性髓性白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | KG-1人急性髓性白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
英文名稱 | KG-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 125ML、500ML |
貨號(hào) | P-X183 |
產(chǎn)品介紹：
KG-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持KG-1細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含KG-1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于KG-1細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分
IMDM基礎(chǔ)培養(yǎng)基 395 ml
特級(jí)胎牛血清 100 mL
P/S青霉素-鏈霉素 5 mL
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法： 2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
質(zhì)量控制
檢測(cè)項(xiàng)目 | 質(zhì)量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
內(nèi)毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
無菌檢測(cè) | 細(xì)菌 | 陰性 |
真菌 | 陰性 |
支原體 | 陰性 |
細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn) | 細(xì)胞形態(tài) | 正常 |
細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) | 合格 |
實(shí)驗(yàn)原理：
以IMDM培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加20%優(yōu)質(zhì)胎牛血清和1%抗生素，模擬人急性髓性白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)環(huán)境，為KG-1細(xì)胞提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量，支持細(xì)胞的懸浮生長(zhǎng)和增殖，維持細(xì)胞的白血病特性，用于急性髓性白血病的研究和藥物篩選。
培養(yǎng)基配制：
按產(chǎn)品說明書比例，將基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胎牛血清、生長(zhǎng)添加劑、雙抗等成分依次加入無菌容器，輕輕搖晃混合均勻
用0.22μm孔徑無菌濾膜對(duì)混合培養(yǎng)基進(jìn)行過濾除菌，轉(zhuǎn)移至無菌培養(yǎng)基瓶，標(biāo)注配置日期和有效期
配制好的培養(yǎng)基2-8℃避光保存，1個(gè)月內(nèi)使用完畢，避免反復(fù)凍融
廢棄處理：
未使用培養(yǎng)基：密封后高壓滅菌（121℃，20min），按實(shí)驗(yàn)室廢液處理。
用過的培養(yǎng)基：含細(xì)胞碎片或污染物，高壓滅菌后丟棄，避免生物污染。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
1. 細(xì)胞復(fù)蘇
凍存管37℃水浴1-2min解凍，轉(zhuǎn)移至超凈臺(tái)消毒，將細(xì)胞懸液加入含4ml培養(yǎng)基的離心管。
1000rpm離心3min棄上清，加1-2ml培養(yǎng)基重懸，接種至培養(yǎng)瓶，補(bǔ)液至6-8ml，37℃、5%CO?培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜，次日換液觀察。
2. 細(xì)胞傳代
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%時(shí)，棄舊培養(yǎng)基，用PBS潤(rùn)洗1-2次。
加1ml消化液浸潤(rùn)細(xì)胞，37℃消化1-3min，細(xì)胞變圓脫落時(shí)加2-3ml培養(yǎng)基終止消化，吹打形成單細(xì)胞懸液。
1000rpm離心5min棄上清，加1-2ml培養(yǎng)基重懸，按1:2比例接種至新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)液至8ml，培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞凍存
棄舊培養(yǎng)基，PBS潤(rùn)洗1次，加1ml消化液消化，細(xì)胞脫落后加培養(yǎng)基終止，吹打形成懸液轉(zhuǎn)移至離心管。
1000rpm離心5min棄上清，PBS清洗1次，離心后棄液。
加無血清凍存液調(diào)整細(xì)胞密度至5×10?～1×10?/ml，分裝至凍存管。
程序降溫盒中-80℃冷凍24h后，轉(zhuǎn)移至液氮罐長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
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關(guān)鍵字： KG-1;人急性髓性白血病;細(xì)胞專用培養(yǎng)基;
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