Li-7人肝癌細胞專用培養(yǎng)基

商品屬性：

產品介紹：

Li-7 細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試，本產品可保持Li-7 細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產品中已包含Li-7  細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于Li-7  細胞的培養(yǎng)。

產品主要成分

RPMI-1640 基礎培養(yǎng)基           435 ml

特級胎牛血清     50 mL

P/S青霉素-鏈霉素           5 mL

GlutaMAX-1谷氨酰胺                     5 mL

Sodium Pyruvate丙酮酸鈉             5 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存1個月；-20℃，避光，保存3個月。
質量控制

實驗原理：

以RPMI-1640培養(yǎng)基為基礎，添加10%優(yōu)質胎牛血清和1%抗生素，模擬人肝癌細胞的生長環(huán)境，為Li-7細胞提供充足的營養(yǎng)物質和能量，支持細胞的貼壁生長和增殖，維持細胞的肝癌特性，用于肝癌的研究和藥物篩選。
準備工作：

1. 試劑與材料

細胞專用培養(yǎng)基（包含基礎培養(yǎng)基、生長添加劑、特級胎牛血清、雙抗）

不含鈣、鎂離子的PBS緩沖液

0.25%Trypsin-0.02%EDTA消化液

無血清細胞凍存液

T25培養(yǎng)瓶、6cm培養(yǎng)皿、無菌離心管、移液槍及槍頭等無菌耗材

2. 儀器設備

37℃、5%CO?培養(yǎng)箱

低溫離心機

-80℃超低溫冰箱

液氮罐

倒置顯微鏡

超凈工作臺

培養(yǎng)基配制：

在超凈工作臺中，將500ml基礎培養(yǎng)基倒入無菌容器中。

依次加入5ml上皮細胞生長添加劑、10ml特級胎牛血清和5ml雙抗（青霉素/鏈霉素），輕輕搖晃容器使其充分混合均勻。

用0.22μm孔徑的無菌濾膜對混合后的培養(yǎng)基進行過濾除菌，然后轉移至無菌培養(yǎng)基瓶中備用。
操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司正在出售的產品：