兔胰島細(xì)胞

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔胰島分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖；γ細(xì)胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細(xì)胞作為糖尿病新藥的細(xì)胞篩選模型需保持其結(jié)構(gòu)完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長(zhǎng)的存活時(shí)間。胰島占胰腺總質(zhì)量的1%-2%，每個(gè)胰島大概含有1000個(gè)細(xì)胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產(chǎn)生的嚴(yán)重低血糖癥狀，具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點(diǎn)，是有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經(jīng)過(guò)供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結(jié)果鑒定等步驟，分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇。

方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰島采用膠原酶灌注消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)  實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰島經(jīng)DTZ染色檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品信息：

 培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔胰島體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

獲取與培養(yǎng)的挑戰(zhàn)：

盡管價(jià)值巨大，但原代細(xì)胞的研究和應(yīng)用也面臨著顯著的挑戰(zhàn)：

獲取困難：需要從新鮮組織中分離，對(duì)取材時(shí)間（通常在4-6小時(shí)的黃金窗口期內(nèi)）、無(wú)菌操作和組織活性都有極高要求。

培養(yǎng)苛刻：原代細(xì)胞非常脆弱，需要特定的、成分復(fù)雜的培養(yǎng)基和生長(zhǎng)因子，對(duì)培養(yǎng)環(huán)境（如溫度、pH值）極為敏感。

批次差異：由于來(lái)源于不同的供體，不同批次的細(xì)胞在遺傳背景和生理狀態(tài)上存在固有差異，這給實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性帶來(lái)了挑戰(zhàn)。

成本高昂：從獲取、分離到培養(yǎng)，整個(gè)過(guò)程耗時(shí)、費(fèi)力且昂貴。

公司正在出售的產(chǎn)品：

組織塊培養(yǎng)法

取材與剪切

在無(wú)菌條件下取出組織，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、結(jié)締組織等非目標(biāo)成分。

用眼科剪將組織剪切成 0.5-1 mm3 的小塊。

接種

用吸管將組織塊均勻地貼附在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的內(nèi)表面，各組織塊之間保持一定間距（約0.5 cm）。

吸去多余液體，將培養(yǎng)器皿翻轉(zhuǎn)，放入 37℃、5% CO 的培養(yǎng)箱中，靜置 1-3小時(shí)，讓組織塊牢固貼壁。

加液培養(yǎng)

待組織塊貼壁后，輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，從一側(cè)緩慢加入足量的培養(yǎng)液，使組織塊浸沒(méi)在液體中，注意不要讓液體直接沖擊組織塊，以免沖起。

繼續(xù)在培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。通常 3-5天 后可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出。