兔神經(jīng)干細胞
細胞簡介：
兔神經(jīng)干分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)干細胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞的能力，能自我更新，并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經(jīng)干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細胞。需要強調(diào)的是，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中，不同的神經(jīng)干細胞類型產(chǎn)生的子代細胞種類不同，分布也不同。神經(jīng)干細胞作為干細胞的一種，它具有其它所有干細胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應能力。神經(jīng)干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向神經(jīng)細胞、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞分化的能力，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)模型是其基礎和臨床應用的前提。神經(jīng)干細胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經(jīng)球，神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長，予以更換半量培基，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細胞懸液，將部分細胞接種到新的培養(yǎng)瓶中，2×105個細胞/瓶，每7-10d傳代1次，每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次，培養(yǎng)條件不變。
方法簡介 實驗室分離的兔神經(jīng)干采用消化后差速貼壁，結合神經(jīng)干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔神經(jīng)干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品信息：
英文名稱 | Rabbit Neural Stem Cells | 種屬 | 兔 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 貨號 | A01X2202 |
組織來源 | 腦 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：球形
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%，Accutase
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔神經(jīng)干體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
獲取與培養(yǎng)的挑戰(zhàn)：
盡管價值巨大，但原代細胞的研究和應用也面臨著顯著的挑戰(zhàn)：
獲取困難：需要從新鮮組織中分離，對取材時間（通常在4-6小時的黃金窗口期內(nèi)）、無菌操作和組織活性都有極高要求。
培養(yǎng)苛刻：原代細胞非常脆弱，需要特定的、成分復雜的培養(yǎng)基和生長因子，對培養(yǎng)環(huán)境（如溫度、pH值）極為敏感。
批次差異：由于來源于不同的供體，不同批次的細胞在遺傳背景和生理狀態(tài)上存在固有差異，這給實驗的可重復性帶來了挑戰(zhàn)。
成本高昂：從獲取、分離到培養(yǎng)，整個過程耗時、費力且昂貴。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人疊氮胸苷(AZT)PCR檢測試劑盒 | MFAP3L 微絲相關蛋白3樣抗體 |
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)PCR檢測試劑盒 | ATP依賴RNA解旋酶DDX28抗體 |
小鼠含IQ基元GTP酶激活蛋白1(IQGAP1)PCR檢測試劑盒 | 周期素D3兔單克隆抗體 |
大鼠瓜氨酸PCR檢測試劑盒免費代測 | Prostaglandin dehydrogenase 1 前列腺素脫氫酶1抗體 |
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LYPD3抗體 | 小鼠胰島素（INS）PCR檢測試劑盒 |
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FITC標記小鼠CD25單克隆抗體 | 雞H5型禽流感病毒(H5N1)抗體(IgG)PCR檢測試劑盒免費代測 |
ZFP95/ZKSCAN5 鋅指蛋白95抗體 | 小鼠凝血因子Ⅻ(F12)PCR檢測試劑盒 |
卵巢、胎盤、前列腺、睪丸蛋白22抗體 | AGXT 丙氨酸乙醛酸轉氨酶單克隆抗體 |
兔牙齦上皮細胞 | 兔神經(jīng)干細胞Rabbit Scleral Fibroblast Cells |
人毛囊角質(zhì)細胞 | Primary human adipose microvascular endothelial cells |
細胞培養(yǎng)操作：
組織塊培養(yǎng)法
取材與剪切
在無菌條件下取出組織，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、結締組織等非目標成分。
用眼科剪將組織剪切成 0.5-1 mm3 的小塊。
接種
用吸管將組織塊均勻地貼附在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的內(nèi)表面，各組織塊之間保持一定間距（約0.5 cm）。
吸去多余液體，將培養(yǎng)器皿翻轉，放入 37℃、5% CO 的培養(yǎng)箱中，靜置 1-3小時，讓組織塊牢固貼壁。
加液培養(yǎng)
待組織塊貼壁后，輕輕翻轉培養(yǎng)瓶，從一側緩慢加入足量的培養(yǎng)液，使組織塊浸沒在液體中，注意不要讓液體直接沖擊組織塊，以免沖起。
繼續(xù)在培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。通常 3-5天 后可觀察到細胞從組織塊邊緣長出。
關鍵字： 兔神經(jīng)干細胞;腦;貼壁;
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