人膽囊微血管內(nèi)皮細胞
細胞簡介：
膽囊，是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構(gòu)造，有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。微血管作為分布廣的血管。它是連接微動脈和微靜脈的血管。它們分支并互相吻合成網(wǎng)。管壁薄，通透性強。其功能是利于血液與組織之間進行物質(zhì)交換。微血管管壁主要由一層內(nèi)皮細胞和基膜組成。細的橫切面由一個內(nèi)皮細胞圍成。
人膽囊微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)
細胞特性：
1）細胞來源于人正常膽囊組織。
2)細胞鑒定：vWF熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品信息：
英文名稱 | Primary human gallbladder microvascular endothelial cells | 種屬 | 人 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 貨號 | A01X1307 |
組織來源 | 膽囊組織 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞培養(yǎng)操作：
1. 細胞復(fù)蘇
運輸與接收：細胞以液氮凍存形式運輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細胞瓶，置于超凈臺內(nèi)無菌操作。
復(fù)蘇操作：將細胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。
2. 細胞傳代
傳代時機：當細胞密度達80%匯合度時進行傳代。
操作步驟：
棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細胞變圓脫落。
加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細胞完全脫落。
離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。
按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個T25瓶），補充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。
換液頻率：每2-3天換液一次。
3. 細胞凍存
凍存液：使用無血清凍存液。
凍存步驟：細胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉(zhuǎn)入液氮長期保存。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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人甲狀腺成纖維細胞 | Human primary bladder cancer associated fibroblasts;CAFs |
核心特點：
高度生理相關(guān)性：保留了體內(nèi)來源組織的結(jié)構(gòu)、功能和基因表達特征。
有限壽命：與無限增殖的腫瘤細胞系不同，原代細胞增殖能力有限，經(jīng)過一定次數(shù)的分裂后會進入衰老期，這更符合正常細胞的生理狀態(tài)。
異質(zhì)性：初始培養(yǎng)物通常是多種細胞類型的混合物，有時需要通過差速貼壁等方法進行純化。
操作要求高：對培養(yǎng)環(huán)境、試劑質(zhì)量和無菌操作的要求極為嚴格，培養(yǎng)難度大于永生化細胞系。
關(guān)鍵字： 人膽囊微血管內(nèi)皮細胞;膽囊組織;貼壁;
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