真核生物18S核酸檢測試劑盒
（PCR-熒光探針法）- 盧卡科技 Lookest
產(chǎn)品名稱：真核生物18S核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
品牌：盧卡科技（Lookest?）
貨號：LK-18S-Uni（48T）
規(guī)格：48次/盒 0.1PCR管 48次/盒 0.2PCR管 48次/盒 非一管式
檢測方法：實時熒光定量PCR（TaqMan探針法）
執(zhí)行標準：通用型真核生物核酸檢測規(guī)范，適配BJS 202412、BJS 202410等行業(yè)標準，可配套各類分子檢測實驗使用
適用儀器：兼容ABI、Bio-Rad、羅氏、博日、宏石、天隆等所有主流實時熒光定量PCR儀，開箱適配無需調(diào)試
檢測靶點：真核生物18S rRNA基因高度保守區(qū)域，覆蓋動物、植物、真菌等所有真核生物，種間通用性極強，特異性靶向真核生物專屬序列
一、產(chǎn)品簡介
盧卡科技（Lookest?）真核生物18S核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法），依托13年分子檢測技術沉淀，針對所有真核生物（動物/植物/真菌）通用保守18S rRNA基因設計特異性引物與TaqMan熒光探針，專為真核生物核酸定性檢測打造。
試劑盒采用預混式反應體系，含UNG酶防污染體系，操作簡便、通用性強、靈敏度高、穩(wěn)定性好，可快速、精準檢測各類樣品中的真核生物核酸，有效區(qū)分真核與原核生物，避免交叉誤判。廣泛適用于食品/飼料質(zhì)檢、海關檢疫、第三方檢測、科研實驗、疾控篩查、企業(yè)內(nèi)控等全場景，為真核生物成分鑒定、物種篩查、樣品中真核成分有無判定提供核心技術支撐。
產(chǎn)品經(jīng)多批次實驗室驗證與實際應用測試，性能穩(wěn)定、結果準確，完全符合行業(yè)檢測規(guī)范，可直接用于合規(guī)檢測報告出具，確保檢測數(shù)據(jù)可重復、可追溯。
二、產(chǎn)品核心優(yōu)勢
1. 全真核通用覆蓋
靶向18S rRNA基因高度保守區(qū)域，1盒覆蓋所有真核生物：動物類（畜禽、水產(chǎn)、寵物、人類、昆蟲等）、植物類（糧食、果蔬、油料、飼料作物等）、真菌類（酵母、霉菌、食用菌等），徹底解決多物種真核檢測需多套試劑的痛點，大幅降低檢測成本。
2. 特異性極強，無交叉反應
特異性≥98%，僅特異性擴增真核生物18S rRNA基因，經(jīng)50+常見物種交叉反應驗證，與原核生物（細菌、支原體）、病毒、質(zhì)粒、載體DNA無任何交叉反應，靶點保守性強，不同真核生物間無種內(nèi)差異，杜絕假陽性結果。
3. 超高靈敏度，適配微量檢測
最低檢測限低至10-100拷貝/反應，質(zhì)量分數(shù)檢出限≤0.001%，可穩(wěn)定檢測樣品中微量、降解的真核生物核酸，適配高溫、腌制、輻照等深度加工樣品，避免漏檢；樣品DNA濃度1ng/μL-100ng/μL均可正常檢測，無需額外調(diào)整濃度，降低操作門檻。
4. 全流程質(zhì)控保障
配套完整陰陽性對照體系，可有效驗證PCR反應體系有效性，排查試劑失效、體系配制錯誤、樣品提取失敗等問題，避免檢測偏差，符合行業(yè)“全程質(zhì)控”要求，確保檢測結果可靠。
5. 預混即開，操作高效
2×預混式反應體系，已提前配制熱啟動Taq酶、dNTPs、特異性引物探針、PCR緩沖液等核心組分，無需手動分步配液，新手按說明書即可快速上手；單批檢測全程60-80分鐘，適配96孔高通量批量檢測，大幅提升檢測效率。
6. 防污染設計，穩(wěn)定性突出
配備UNG酶防污染體系+dUTP設計，可降解殘留PCR擴增產(chǎn)物，結合閉管檢測模式，杜絕實驗室氣溶膠污染；-20℃避光保存，有效期12-15個月，反復凍融≤5次性能無明顯下降，批次間變異系數(shù)（CV）<5%，Ct值偏差≤0.8，確保批次一致性。
7. 強抗干擾，適配復雜基質(zhì)
可耐受食品、飼料、組織樣品中常見干擾物質(zhì)（多糖、多酚、油脂、鹽、腐殖酸等），即使在高干擾復雜基質(zhì)樣品中，仍可穩(wěn)定檢測，避免假陰性結果，適配各類檢測場景。
三、核心性能參數(shù)
1. 靈敏度（適配微量真核成分檢測）
核酸檢測限：10-100拷貝/反應，微量真核核酸可穩(wěn)定檢出；
質(zhì)量分數(shù)檢出限：≤0.001%（極端微量真核成分），遠優(yōu)于行業(yè)平均水平；
適用DNA濃度：1ng/μL-100ng/μL，無需額外調(diào)整濃度，降低操作難度；
降解DNA適配：可有效檢測高溫、腌制、輻照、高壓滅菌等導致的降解真核DNA，避免漏檢。
2. 特異性（真核專屬，無交叉誤判）
物種特異性：僅擴增真核生物DNA，與細菌、支原體、病毒等原核生物無任何交叉反應；
靶點特異性：靶向18S rRNA基因保守區(qū)，不與其他基因序列結合，檢測結果精準；
交叉驗證：經(jīng)50+常見物種（畜禽、水產(chǎn)、植物、微生物）交叉測試，無假陽性反應。
3. 穩(wěn)定性（保障批次一致，耐用性強）
保存穩(wěn)定性：-20℃避光密封保存，有效期12-15個月，適配實驗室長期儲存需求；
運輸穩(wěn)定性：采用干冰冷鏈運輸（溫度≤-20℃），運輸時間≤72小時，性能無衰減；
批次間穩(wěn)定性：變異系數(shù)（CV）<5%，不同批次產(chǎn)品檢測同一陽性樣品，Ct值偏差≤0.8，符合行業(yè)重復性要求；
抗干擾穩(wěn)定性：耐受樣品中常見干擾物質(zhì)，復雜基質(zhì)樣品檢測穩(wěn)定，避免假陰性。
4. 準確性（全程質(zhì)控，結果可追溯）
質(zhì)控體系：每盒試劑盒均配套真核生物陽性對照、陰性對照，可有效驗證PCR反應體系有效性，排查實驗故障；
防污染設計：UNG酶防污染體系+閉管檢測模式，杜絕實驗室交叉污染，符合行業(yè)實驗室操作規(guī)范；
結果判定：嚴格按行業(yè)標準Ct值閾值判定，結果清晰明確，無需復雜分析，可直接用于合規(guī)檢測報告出具。
四、產(chǎn)品組成（標準配套，即開即用）
組件名稱 | 規(guī)格 |
|---|
A-18S-P（18S PCR反應預混液） | 20μL×8管×6排 |
NG-P（陰性對照） | 100μL×2支 |
PG-18S-P（陽性對照） | 100μL×1支 |
產(chǎn)品說明書 | 1份 |
五、適用樣品與場景（全領域覆蓋，符合行業(yè)適用范圍）
本試劑盒適配各類真核生物核酸檢測場景，完全符合行業(yè)檢測規(guī)范，重點覆蓋以下核心場景：
1. 食品/飼料檢測（核心應用場景）
生鮮/加工類：生鮮肉類、肉制品、水產(chǎn)、罐頭、鹵味、速凍食品、方便食品等；
飼料類：配合飼料、濃縮飼料、飼料原料（肉骨粉、魚粉、動物內(nèi)臟粉等）、寵物食品；
特殊食品：清真食品、動植物混合制品、摻假鑒定（排查真核成分有無）。
2. 科研與疾控實驗
真核生物定性/定量檢測、物種篩查、微生物組（真菌18S）分析；
環(huán)境樣本檢測：土壤、水體、空氣等環(huán)境中真核生物篩查；
生物樣本檢測：細胞、組織、石蠟切片、FFPE樣本真核核酸檢測。
3. 海關/質(zhì)檢/第三方實驗室
4. 企業(yè)內(nèi)控與科研應用
六、實驗操作流程（標準通用，新手可直接操作）
全程嚴格遵循行業(yè)檢測規(guī)范，操作簡單易上手，無需專業(yè)分子生物學經(jīng)驗：
1. 樣品DNA提取
按標準方法對樣品進行粉碎、均質(zhì)，采用常規(guī)基因組DNA提取方法（可使用盧卡科技配套DNA提取試劑盒）提取樣品總DNA，確保DNA純度OD260/OD280=1.8-2.0，濃度1-100ng/μL，避免雜質(zhì)干擾。
2. 反應體系配制（25μL體系）
在無菌離心管/96孔PCR板中，依次加入A-18S-P預混液20μL、樣品DNA（或陽性/陰性對照）5μL，輕輕顛倒混勻，5000rpm離心30秒，避免氣泡產(chǎn)生。
3. PCR擴增程序
將配制好的反應體系放入熒光定量PCR儀，設置標準擴增程序：50℃ 2min（UNG酶防污染消化）；95℃ 10min（預變性）；95℃ 15s → 60℃ 30s（收集FAM通道熒光），共40個循環(huán)，啟動擴增程序。
4. 結果判讀
擴增結束后，嚴格按行業(yè)標準判定規(guī)則，結合陰陽性對照結果，對樣品進行結果判定。
5. 實驗收尾
規(guī)范處理實驗廢棄物，清潔實驗臺面與器具，紫外消毒實驗室環(huán)境，符合行業(yè)實驗室清潔要求。
七、結果判定標準（行業(yè)統(tǒng)一，可直接用于合規(guī)報告）
嚴格遵循行業(yè)檢測規(guī)范判定規(guī)則，確保結果統(tǒng)一、合規(guī)、可追溯：
第一步：實驗有效性判定
需同時滿足以下兩個條件，本次實驗結果方為有效，否則實驗無效，需重新檢測：
第二步：樣品結果判定
18S通道（FAM）檢測結果 | 判定標準 | 最終結論 |
|---|
陽性 | Ct≤35，且有典型指數(shù)增長擴增曲線 | 樣品中檢出真核生物核酸 |
可疑 | 35<Ct<40，有擴增曲線 | 需重復檢測，重復后Ct≤35判定為陽性，否則為陰性 |
陰性 | Ct≥40或無擴增曲線 | 樣品中未檢出真核生物核酸 |
備注：檢測前需確保DNA提取符合行業(yè)標準要求，深度加工、高干擾復雜基質(zhì)樣品，需優(yōu)化提取流程確保核酸完整性，保障檢測結果可靠。
八、儲存、運輸與有效期
儲存條件：-20℃避光密封保存，避免反復凍融（建議分裝保存），防止試劑性能損耗；
運輸條件：采用干冰低溫運輸（運輸過程溫度保持-20℃以下），運輸時間≤72小時，收到試劑盒后需立即放入-20℃冰箱保存，避免試劑失效；
有效期：在規(guī)定儲存條件下，試劑盒有效期為12-15個月（具體以產(chǎn)品外包裝標注為準），超過有效期的試劑請勿使用；
開封注意事項：試劑盒開封后，建議在1個月內(nèi)使用完畢，減少反復凍融對試劑性能的影響。
九、常見問題解答
1. 實驗無擴增曲線，可能是什么原因？
答：① 樣品DNA提取失敗或降解，需按行業(yè)標準流程重新提取，確保DNA純度與濃度達標，尤其深度加工樣品需優(yōu)化提取流程；② PCR反應體系配制錯誤，檢查試劑添加量、是否漏加試劑；③ 儀器擴增程序設置錯誤，參考說明書調(diào)整參數(shù)，確保熒光通道選擇正確；④ 試劑過期或儲存不當，檢查試劑儲存條件與有效期。
2. 陰性對照出現(xiàn)擴增曲線，如何處理？
答：大概率存在實驗室污染或試劑污染，需更換陰性對照試劑，全面清潔實驗臺面、移液器、槍頭、離心管等實驗器具，紫外消毒實驗室環(huán)境后重新實驗；若仍出現(xiàn)擴增，需更換新批次試劑。
3. 試劑盒能否區(qū)分真核生物與原核生物？
答：可以。本試劑盒僅特異性擴增真核生物18S rRNA基因，經(jīng)嚴格交叉反應驗證，與細菌、支原體等原核生物無任何交叉反應，可精準區(qū)分真核與原核生物，杜絕交叉誤判。
4. 試劑盒是否符合行業(yè)標準，可用于官方檢測與報告出具嗎？
答：可以。本試劑盒完全適配BJS 202412、BJS 202410等行業(yè)標準，檢測流程、擴增參數(shù)、質(zhì)控體系、結果判定均符合行業(yè)要求，可用于市場監(jiān)管、海關檢疫、第三方檢測、司法鑒定等合規(guī)場景，檢測結果可直接用于報告出具。
5. 試劑盒能否檢測深度加工的樣品？
答：可以。本試劑盒靈敏度高、抗干擾能力強，可有效檢測高溫、腌制、輻照、高壓滅菌等深度加工樣品中降解的真核生物核酸，適配各類復雜基質(zhì)樣品的檢測需求，避免漏檢。
十、品牌與服務保障
廣州盧卡科技有限公司（Lookest?）是專注分子檢測技術研發(fā)、生產(chǎn)與服務的高新技術企業(yè)，依托13年行業(yè)沉淀，聯(lián)合中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所、珠海市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與食品安全重點實驗室兩大權威科研平臺，打造從試劑研發(fā)、生產(chǎn)到技術服務的全鏈條體系，產(chǎn)品覆蓋動物源性成分鑒定、植物源性檢測、轉(zhuǎn)基因篩查、食源性致病菌檢測、水產(chǎn)病害檢測、真核生物檢測等多個領域，服務網(wǎng)絡覆蓋全國60+檢測服務網(wǎng)點。
公司擁有GMP標準化生產(chǎn)車間與完善的質(zhì)量控制體系，每批次產(chǎn)品均通過靈敏度、特異性、穩(wěn)定性、準確性四重驗證，附帶行業(yè)質(zhì)檢報告，確保產(chǎn)品完全符合行業(yè)標準要求，性能穩(wěn)定可靠。同時提供全流程技術支持，包括行業(yè)標準操作培訓、樣品處理優(yōu)化、實驗故障排查、定制化檢測方案開發(fā)，售后24小時內(nèi)響應，助力用戶高效完成合規(guī)檢測。