PANC-1人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基

商品屬性：

產品介紹：

PANC-1細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產品可保持PANC-1細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產品中已包含PANC-1 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于PANC-1 細胞的培養(yǎng)。

產品主要成分

DMEM 基礎培養(yǎng)基     415 ml

特級胎牛血清    75 ml

GlutaMAX-1谷氨酰胺             5 ml

P/S青霉素-鏈霉素           5 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存1個月；-20℃，避光，保存3個月。
質量控制

實驗原理：

以DMEM高糖培養(yǎng)基為基礎，添加10%優(yōu)質胎牛血清和1%抗生素，模擬人胰腺癌細胞的生長環(huán)境，為PANC-1細胞提供充足的營養(yǎng)物質和能量，支持細胞的貼壁生長和增殖，維持細胞的胰腺癌特性，用于胰腺癌的研究和藥物篩選。
使用方法：

1. 培養(yǎng)基配制（若為干粉或基礎培養(yǎng)基）

將500ml基礎培養(yǎng)基溶解于適量超純水中，攪拌均勻。

依次加入5ml生長添加劑、10ml特級胎牛血清和5ml雙抗，輕輕搖勻。

用無菌濾膜（0.22μm孔徑）對混合后的培養(yǎng)基進行過濾除菌，轉移至無菌容器中備用。

2. 細胞培養(yǎng)操作

（1）復蘇細胞

將含有1ml細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中，輕輕搖晃加速解凍。

解凍后，將細胞懸液轉移至無菌離心管中，加入4ml完全培養(yǎng)基混合均勻。

1000rpm離心3min，棄去上清液，加入1-2ml完全培養(yǎng)基重懸細胞。

將細胞懸液接種至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿中，補充適量完全培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜，第二天換液并檢查細胞密度。

（2）傳代培養(yǎng)

當細胞密度達到80%-90%時，進行傳代操作。首先棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

加入1ml消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3min，顯微鏡下觀察細胞大部分變圓并脫落時，迅速拿回操作臺。

輕敲培養(yǎng)瓶，加入2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打制成單細胞懸液。

將細胞懸液轉移至無菌離心管，1000rpm離心5min，棄去上清液，加入1-2ml完全培養(yǎng)基重懸細胞。

按1:2的比例將細胞懸液接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，補充完全培養(yǎng)基至8ml，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）細胞凍存

待細胞生長狀態(tài)良好時，收集細胞懸液，1000rpm離心4min，棄去上清液，用PBS清洗一遍。

加入無血清凍存液，調整細胞密度至5×10?～1×10?/mL，輕輕混勻。

將細胞懸液分裝至凍存管中，每管1ml，做好標記。

將凍存管放入-80℃冰箱預凍24h后，轉入液氮罐中長期儲存。
注意事項：

整個操作過程必須嚴格遵守無菌操作規(guī)范，避免細菌、真菌等微生物污染培養(yǎng)基和細胞。

運輸用的灌液培養(yǎng)基不能再用于培養(yǎng)細胞，收到細胞后需更換為按照說明書新配制的完全培養(yǎng)基。

為保證細胞存活率，收到凍存細胞后請立即解凍復蘇，若無法立即操作，凍存細胞可在-80℃條件下保存1個月。

首次傳代建議采用1:2的傳代比例，后續(xù)可根據(jù)細胞生長情況調整傳代比例。

產品僅供科學研究使用，不可用于動物或人類疾病的治療及臨床診斷。
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