產(chǎn)品介紹：
MCF-7/Adr細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持MCF-7/Adr細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含 MCF-7/Adr細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于MCF-7/Adr 細胞的培養(yǎng)。
注：本培養(yǎng)基是不直接添加ADR 藥物的。
產(chǎn)品名稱 | MCF-7/Adr人乳腺癌阿霉素耐藥細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | P-X209 |
英文名稱 | MCF-7/adr細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 125ML、500ML |
產(chǎn)品主要成分
RPMI-1640基礎培養(yǎng)基 445ml
特級胎牛血清 50 ml
P/S青霉素-鏈霉素 5 ml
運輸和保存
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法： 2℃～8℃，避光，保存1個月；-20℃，避光，保存3個月。
質(zhì)量控制
檢測項目 | 質(zhì)量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
內(nèi)毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
無菌檢測 | 細菌 | 陰性 |
真菌 | 陰性 |
支原體 | 陰性 |
細胞生長試驗 | 細胞形態(tài) | 正常 |
細胞生長實驗 | 合格 |
實驗原理：
以RPMI-1640培養(yǎng)基為基礎，添加10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清和1%抗生素，同時添加適量的阿霉素，篩選出對阿霉素耐藥的MCF-7細胞株，模擬人乳腺癌阿霉素耐藥細胞的生長環(huán)境，為MCF-7/Adr細胞提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)和能量，支持細胞的貼壁生長和增殖，用于乳腺癌耐藥機制的研究和抗耐藥藥物的篩選。
準備工作：
1. 試劑與材料
細胞專用培養(yǎng)基（包含基礎培養(yǎng)基、生長添加劑、特級胎牛血清、雙抗）
不含鈣、鎂離子的PBS緩沖液
0.25%Trypsin-0.02%EDTA消化液
無血清細胞凍存液
T25培養(yǎng)瓶、6cm培養(yǎng)皿、無菌離心管、移液槍及槍頭等無菌耗材
2. 儀器設備
37℃、5%CO?培養(yǎng)箱
低溫離心機
-80℃超低溫冰箱
液氮罐
倒置顯微鏡
超凈工作臺
培養(yǎng)基配制：
在超凈工作臺中，將500ml基礎培養(yǎng)基倒入無菌容器中。
依次加入5ml上皮細胞生長添加劑、10ml特級胎牛血清和5ml雙抗（青霉素/鏈霉素），輕輕搖晃容器使其充分混合均勻。
用0.22μm孔徑的無菌濾膜對混合后的培養(yǎng)基進行過濾除菌，然后轉(zhuǎn)移至無菌培養(yǎng)基瓶中備用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
家兔皮膚細胞；DR-S1 | 泛激4(PANK4)ELISA試劑盒 |
大額牛肺細胞；BFR-L1 | 鈣黏蛋白24(CDH24)ELISA試劑盒 |
豹貓肺成纖維樣細胞；LCL3 | 人溴脫氧核(BrdU) ELISA檢測試劑盒 |
豹貓肺成纖維樣細胞；LCL1 | 封閉蛋白6(CLDN6)ELISA試劑盒 |
豹貓肌肉成纖維樣細胞；LCM4 | 鈣磷蛋白(CAPS)ELISA試劑盒 |
雪羊皮膚細胞；SSHS1 | 泛激1(PANK1)ELISA試劑盒 |
白牦牛皮膚細胞；Yak-2 | 泛特異性肽8(USP8)ELISA試劑盒 |
抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白單抗雜交瘤細胞；Ferritin-1 | 泛激2(PANK2)ELISA試劑盒 |
耐長春新堿胃腺癌細胞 | 封閉蛋白8(CLDN8)ELISA試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；IE9B2F9F4 | 封閉蛋白9(CLDN9)ELISA試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；IG9 | 弗林蛋白(FUR)ELISA試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；4G10 | 鈣結合蛋白3(CALB3)ELISA試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；4G11 | MCF-7/Adr人乳腺癌阿霉素耐藥細胞專用培養(yǎng)基鈣聯(lián)接蛋白(CLGN)ELISA試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞；4E1 | 鈣蛋白9(CAPN9)ELISA試劑盒 |
大額牛皮膚細胞；BFR-S3 | 鈣蛋白8(CAPN8)ELISA試劑盒 |
家兔皮膚細胞；DR-S1 | 泛激4(PANK4)ELISA試劑盒 |
大額牛肺細胞；BFR-L1 | 鈣黏蛋白24(CDH24)ELISA試劑盒 |
豹貓肺成纖維樣細胞；LCL3 | 人溴脫氧核(BrdU) ELISA檢測試劑盒 |
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
關鍵字： MCF-7/Adr;人乳腺癌阿霉素耐藥;細胞專用培養(yǎng)基;
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