RBE人肝膽管癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | RBE人肝膽管癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
英文名稱 | RBE細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 125ML、500ML |
貨號 | P-X303 |
產(chǎn)品介紹：
RBE細(xì)胞專用培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持RBE 細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含RBE細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于RBE細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分
RPMI-1640（含NaHCO3 1.5g / L）培養(yǎng)基 445 mL
特級胎牛血清 50 mL
P/S青霉素-鏈霉素 5 mL
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；-20℃，避光，保存6個月。
質(zhì)量控制
檢測項目 | 質(zhì)量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
內(nèi)毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
無菌檢測 | 細(xì)菌 | 陰性 |
真菌 | 陰性 |
支原體 | 陰性 |
細(xì)胞生長試驗(yàn) | 細(xì)胞形態(tài) | 正常 |
細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) | 合格 |
實(shí)驗(yàn)原理：
以RPMI-1640培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清和1%抗生素，模擬人肝膽管癌細(xì)胞的生長環(huán)境，為RBE細(xì)胞提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)和能量，支持細(xì)胞的貼壁生長和增殖，維持細(xì)胞的肝膽管癌特性，用于肝膽管癌的研究和藥物篩選。
使用方法：
（一）常規(guī)使用步驟
培養(yǎng)基從 2~8℃取出，37℃水浴預(yù)熱 15~20min，避免冷刺激細(xì)胞。
超凈臺內(nèi)用 75% 酒精擦拭培養(yǎng)基瓶身，無菌操作開封。
吸棄培養(yǎng)瓶中舊培養(yǎng)基，加入預(yù)熱的專用培養(yǎng)基（T25 瓶加 5~6mL，T75 瓶加 12~15mL）。
置于37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
（二）細(xì)胞復(fù)蘇
液氮取出凍存管，37℃快速融化（1~2min），75% 酒精消毒后轉(zhuǎn)入超凈臺。
細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含 5mL 預(yù)熱專用培養(yǎng)基的 15mL 離心管，1000rpm（200g）離心 3min，棄上清。
加 5mL 專用培養(yǎng)基重懸，轉(zhuǎn)入 T25 培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)，次日換液去除死細(xì)胞。
（三）細(xì)胞傳代（80~90% 匯合度）
吸棄舊培養(yǎng)基，無菌 PBS（無 Ca2?/Mg2?）洗細(xì)胞 1~2 次，吸棄 PBS。
T25 瓶加 1mL 0.25% 胰酶 - EDTA，37℃消化1~3min，顯微鏡下見細(xì)胞變圓、間隙增大即終止。
加 3~4mL 專用培養(yǎng)基終止消化，輕柔吹打至單細(xì)胞懸液，1000rpm 離心 3min，棄上清。
專用培養(yǎng)基重懸，按1:3~1:4分瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基后 37℃培養(yǎng)。
（四）細(xì)胞凍存
傳代步驟收集細(xì)胞，離心棄上清。
凍存液（90%FBS+10%DMSO）重懸，密度1~3×10?細(xì)胞 / 管。
分裝入凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮長期保存。
注意事項：
所有操作嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范，避免細(xì)胞交叉污染，每次操作僅處理一株細(xì)胞
培養(yǎng)基開封后盡快使用，避免長時間暴露于室溫，未用完部分2-8℃避光保存
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，定期顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)，及時更換培養(yǎng)基或傳代，一般2-3天更換一次培養(yǎng)基
實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄培養(yǎng)基、細(xì)胞懸液等生物廢棄物，按規(guī)定進(jìn)行消毒處理后再排放
若使用預(yù)配置完全培養(yǎng)基，無需額外添加血清、雙抗等成分，直接使用即可
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關(guān)鍵字： RBE;人肝膽管癌;細(xì)胞專用培養(yǎng)基;
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