產(chǎn)品介紹：
TOV-112D細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持TOV-112D細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含TOV-112D細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于TOV-112D細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | TOV-112D人上皮性卵巢癌細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | P-X373 |
英文名稱 | TOV-112D細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 125ML、500ML |
產(chǎn)品主要成分
MCDB 105基礎培養(yǎng)基 （含NAHCO3 1.5 g/L ) 210 mL
M199 基礎培養(yǎng)基 210 mL
特級胎牛血清 75 mL
P/S青霉素-鏈霉素 5 mL
運輸和保存
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法： 2℃～8℃，避光，保存2個月；-20℃，避光，保存6個月。
質量控制
檢測項目 | 質量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
內毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
無菌檢測 | 細菌 | 陰性 |
真菌 | 陰性 |
支原體 | 陰性 |
細胞生長試驗 | 細胞形態(tài) | 正常 |
細胞生長實驗 | 合格 |
實驗原理：
以RPMI-1640培養(yǎng)基為基礎，添加10%優(yōu)質胎牛血清和1%抗生素，模擬人上皮性卵巢癌細胞的生長環(huán)境，為TOV-112D細胞提供充足的營養(yǎng)物質和能量，支持細胞的貼壁生長和增殖，維持細胞的卵巢癌特性，用于卵巢癌的研究和藥物篩選。
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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野生型人c-kit受體細胞株；A7d | 人促性腺激釋放激(GnRH)ELISA試劑盒 |
人T淋巴瘤轉基因細胞；JurkatD,E | 突觸囊泡蛋白Ⅶ(SYT7)ELISA試劑盒 |
使用方法：
（一）常規(guī)使用步驟
培養(yǎng)基從 2~8℃取出，37℃水浴預熱 15~20min，避免冷刺激細胞。
超凈臺內用 75% 酒精擦拭培養(yǎng)基瓶身，無菌操作開封。
吸棄培養(yǎng)瓶中舊培養(yǎng)基，加入預熱的專用培養(yǎng)基（T25 瓶加 5~6mL，T75 瓶加 12~15mL）。
置于37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
（二）細胞復蘇
液氮取出凍存管，37℃快速融化（1~2min），75% 酒精消毒后轉入超凈臺。
細胞懸液轉移至含 5mL 預熱專用培養(yǎng)基的 15mL 離心管，1000rpm（200g）離心 3min，棄上清。
加 5mL 專用培養(yǎng)基重懸，轉入 T25 培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)，次日換液去除死細胞。
（三）細胞傳代（80~90% 匯合度）
吸棄舊培養(yǎng)基，無菌 PBS（無 Ca2?/Mg2?）洗細胞 1~2 次，吸棄 PBS。
T25 瓶加 1mL 0.25% 胰酶 - EDTA，37℃消化1~3min，顯微鏡下見細胞變圓、間隙增大即終止。
加 3~4mL 專用培養(yǎng)基終止消化，輕柔吹打至單細胞懸液，1000rpm 離心 3min，棄上清。
專用培養(yǎng)基重懸，按1:3~1:4分瓶，補足培養(yǎng)基后 37℃培養(yǎng)。
（四）細胞凍存
傳代步驟收集細胞，離心棄上清。
凍存液（90%FBS+10%DMSO）重懸，密度1~3×10?細胞 / 管。
分裝入凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜，次日轉入液氮長期保存。
關鍵字： TOV-112D;人上皮性卵巢癌;細胞專用培養(yǎng)基;
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