雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 |
英文名稱 | 雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100ML、500ML |
貨號 | P-X595 |
產(chǎn)品介紹：
雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化細胞的培養(yǎng)。
上皮細胞培養(yǎng)體系 500 ml
產(chǎn)品主要成分
上皮細胞基礎培養(yǎng)基 480 ml
上皮細胞培養(yǎng)添加劑 5 ml
特級胎牛血清 10 ml
P/S青霉素-鏈霉素 5 ml
運輸和保存
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法： 2℃～8℃，避光，保存2個月；-20℃，避光，保存6個月。
質量控制
檢測項目 | 質量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
內毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
無菌檢測 | 細菌 | 陰性 |
真菌 | 陰性 |
支原體 | 陰性 |
細胞生長試驗 | 細胞形態(tài) | 正常 |
細胞生長實驗 | 合格 |
實驗原理：
以BEGM支氣管上皮細胞專用培養(yǎng)基為基礎，添加10%優(yōu)質胎牛血清、1%雙抗及鼻腔黏膜上皮細胞生長因子，模擬雪貂鼻腔黏膜上皮永生化細胞的呼吸道微環(huán)境。培養(yǎng)基中的成分可支持細胞貼壁生長并維持其鼻腔黏膜上皮細胞功能（如黏液分泌、病原體防御），用于雪貂呼吸道疾?。ㄈ缌鞲?、鼻炎）的研究及藥物篩選。
使用方法：
1. 培養(yǎng)基配制（若為干粉或基礎培養(yǎng)基）
將500ml基礎培養(yǎng)基溶解于適量超純水中，攪拌均勻。
依次加入5ml生長添加劑、10ml特級胎牛血清和5ml雙抗，輕輕搖勻。
用無菌濾膜（0.22μm孔徑）對混合后的培養(yǎng)基進行過濾除菌，轉移至無菌容器中備用。
2. 細胞培養(yǎng)操作
（1）復蘇細胞
將含有1ml細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中，輕輕搖晃加速解凍。
解凍后，將細胞懸液轉移至無菌離心管中，加入4ml完全培養(yǎng)基混合均勻。
1000rpm離心3min，棄去上清液，加入1-2ml完全培養(yǎng)基重懸細胞。
將細胞懸液接種至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿中，補充適量完全培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜，第二天換液并檢查細胞密度。
（2）傳代培養(yǎng)
當細胞密度達到80%-90%時，進行傳代操作。首先棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加入1ml消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3min，顯微鏡下觀察細胞大部分變圓并脫落時，迅速拿回操作臺。
輕敲培養(yǎng)瓶，加入2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打制成單細胞懸液。
將細胞懸液轉移至無菌離心管，1000rpm離心5min，棄去上清液，加入1-2ml完全培養(yǎng)基重懸細胞。
按1:2的比例將細胞懸液接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，補充完全培養(yǎng)基至8ml，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
（3）細胞凍存
待細胞生長狀態(tài)良好時，收集細胞懸液，1000rpm離心4min，棄去上清液，用PBS清洗一遍。
加入無血清凍存液，調整細胞密度至5×10?～1×10?/mL，輕輕混勻。
將細胞懸液分裝至凍存管中，每管1ml，做好標記。
將凍存管放入-80℃冰箱預凍24h后，轉入液氮罐中長期儲存。
注意事項：
無菌操作 全程超凈臺操作，避免交叉污染；培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁、沉淀立即棄用。
溫度控制 使用前必須 37℃預熱，禁止直接冷培養(yǎng)基培養(yǎng)，避免細胞脫落、凋亡。
消化控制 產(chǎn)品對胰酶敏感，嚴格控制消化時間（1~3min），過度消化導致細胞損傷。
血清依賴 禁止使用＜10% FBS 培養(yǎng)，劣質血清會導致 AR/PSA 表達丟失、生長停滯。
雄激素實驗 若開展雄激素相關實驗，需更換為無酚紅 RPMI-1640+10% 活性炭處理血清（CD-FBS），避免酚紅弱雌激素干擾。
僅限科研 本產(chǎn)品僅用于科研實驗，不可用于臨床診斷、治療。
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關鍵字： 雪貂鼻腔粘膜上皮細胞;永生化;細胞專用培養(yǎng)基;
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