豬小腸上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 豬小腸上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
英文名稱 | 豬小腸上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100ML、500ML |
貨號 | P-X594 |
產(chǎn)品介紹：
豬小腸上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持豬小腸上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含豬小腸上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于豬小腸上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞的培養(yǎng)。
上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 500 ml
產(chǎn)品主要成分
上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 480 ml
上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 5 ml
特級胎牛血清 10 ml
P/S青霉素-鏈霉素 5 ml
運輸和保存
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法： 2℃～8℃，避光，保存2個月；-20℃，避光，保存6個月。
質(zhì)量控制
檢測項目 | 質(zhì)量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
內(nèi)毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
無菌檢測 | 細(xì)菌 | 陰性 |
真菌 | 陰性 |
支原體 | 陰性 |
細(xì)胞生長試驗 | 細(xì)胞形態(tài) | 正常 |
細(xì)胞生長實驗 | 合格 |
實驗原理：
以DMEM/F12培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清、1%雙抗及小腸上皮細(xì)胞生長因子（如EGF、TGF-α），模擬豬小腸上皮永生化細(xì)胞的腸道微環(huán)境。培養(yǎng)基中的成分可支持細(xì)胞貼壁生長并維持其小腸上皮細(xì)胞功能（如營養(yǎng)吸收、腸道屏障），用于豬腸道疾?。ㄈ缱胸i腹瀉、腸炎）的研究及藥物篩選。
培養(yǎng)基配置步驟：
1. 配置前準(zhǔn)備
試劑與耗材：MEM培養(yǎng)基粉末（或液體）、優(yōu)質(zhì)胎牛血清、青霉素-鏈霉素混合液、5-溴-2'-脫氧尿苷（可選）、無菌超純水、0.22μm無菌濾膜、無菌血清瓶、移液槍、無菌移液管等
無菌環(huán)境：超凈工作臺提前開啟紫外燈照射30分鐘消毒，實驗人員佩戴無菌手套、口罩，操作前用75%酒精擦拭雙手和工作臺
2. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基配置（以粉末MEM為例）
按照MEM培養(yǎng)基說明書的比例，將適量培養(yǎng)基粉末加入到裝有900ml無菌超純水的無菌燒杯中
用磁力攪拌器充分?jǐn)嚢?，直至培養(yǎng)基粉末完全溶解
加入適量碳酸氫鈉粉末（根據(jù)說明書調(diào)整），調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值至7.2-7.4
將溶液通過0.22μm無菌濾膜過濾除菌，轉(zhuǎn)移至無菌血清瓶中，標(biāo)注“MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基”及配置日期
3. 完全培養(yǎng)基配置
在無菌條件下，向MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入100ml優(yōu)質(zhì)胎牛血清（使血清終濃度為10%）
加入10ml青霉素-鏈霉素混合液（使雙抗終濃度為1%）
若需要篩選TK-細(xì)胞，加入5-溴-2'-脫氧尿苷，使其終濃度為0.015mg/ml
輕輕搖晃血清瓶，使各成分充分混合，標(biāo)注培養(yǎng)基名稱及配置日期
4℃避光保存，使用前提前放置至室溫
4. 培養(yǎng)基質(zhì)量檢測
配置完成后，取少量培養(yǎng)基接種于無菌培養(yǎng)瓶中，37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48小時
觀察培養(yǎng)基是否渾濁、有無菌落生長，確認(rèn)無菌后方可用于細(xì)胞培養(yǎng)
性能檢測與驗證方法：
1. 無菌與內(nèi)毒素檢測
無菌檢測：將培養(yǎng)基接種于細(xì)菌/真菌培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)14天，觀察是否有菌落生長
內(nèi)毒素檢測：采用鱟試劑法或動態(tài)濁度法，定量檢測培養(yǎng)基中內(nèi)毒素含量
2. 細(xì)胞培養(yǎng)驗證
細(xì)胞生長曲線：接種相同數(shù)量細(xì)胞，每天計數(shù)細(xì)胞數(shù)量，繪制生長曲線，評估培養(yǎng)基對細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用
形態(tài)學(xué)觀察：定期用顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，判斷是否保持正常生長狀態(tài)
標(biāo)志物檢測：通過免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)等方法檢測細(xì)胞特異性標(biāo)志物表達(dá)情況
功能實驗：針對不同細(xì)胞類型設(shè)計特定功能實驗，如內(nèi)皮細(xì)胞血管形成實驗、T細(xì)胞殺傷實驗等
公司正在出售的產(chǎn)品：
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關(guān)鍵字： 豬小腸上皮細(xì)胞;永生化;細(xì)胞專用培養(yǎng)基;
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