細(xì)胞簡(jiǎn)介：

結(jié)膜松弛癥（ conjunctivochalasis，CCh）是由于球結(jié)膜過(guò)度松弛和（或）下瞼緣張力高，造成松弛球結(jié)膜堆積在眼球與下瞼緣、內(nèi)外眥部之間，形成皺褶，引起眼表淚液分布異常，并伴有眼部不適如流淚、干澀、異物感等癥狀的眼病。有研究表明結(jié)膜松弛癥中結(jié)膜成纖維細(xì)胞的改變，影響細(xì)胞外基質(zhì)成分的平衡狀態(tài)和穩(wěn)定性，可能是結(jié)膜松弛癥發(fā)生的原因。

細(xì)胞特性：

1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的眼球。

2)細(xì)胞鑒定：結(jié)蛋白（Desmin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

兔結(jié)膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)

產(chǎn)品信息：

英文名稱：Primary rabbit conjunctival fibroblasts

組織來(lái)源：眼球。

默認(rèn)種屬 兔

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1. 細(xì)胞復(fù)蘇

運(yùn)輸與接收：細(xì)胞以液氮凍存形式運(yùn)輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細(xì)胞瓶，置于超凈臺(tái)內(nèi)無(wú)菌操作。

復(fù)蘇操作：將細(xì)胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。

2. 細(xì)胞傳代

傳代時(shí)機(jī)：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%匯合度時(shí)進(jìn)行傳代。

操作步驟：

棄去舊培養(yǎng)基，用無(wú)鈣鎂PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓脫落。

加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細(xì)胞完全脫落。

離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。

按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個(gè)T25瓶），補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。

換液頻率：每2-3天換液一次。

3. 細(xì)胞凍存

凍存液：使用無(wú)血清凍存液。

凍存步驟：細(xì)胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

高度生理相關(guān)性：保留了體內(nèi)來(lái)源組織的結(jié)構(gòu)、功能和基因表達(dá)特征。

有限壽命：與無(wú)限增殖的腫瘤細(xì)胞系不同，原代細(xì)胞增殖能力有限，經(jīng)過(guò)一定次數(shù)的分裂后會(huì)進(jìn)入衰老期，這更符合正常細(xì)胞的生理狀態(tài)。

異質(zhì)性：初始培養(yǎng)物通常是多種細(xì)胞類型的混合物，有時(shí)需要通過(guò)差速貼壁等方法進(jìn)行純化。

操作要求高：對(duì)培養(yǎng)環(huán)境、試劑質(zhì)量和無(wú)菌操作的要求極為嚴(yán)格，培養(yǎng)難度大于永生化細(xì)胞系。