細(xì)胞簡介：
產(chǎn)品名稱 | 豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 組織來源 | 肺組織 |
英文名稱 | Pulmonary microvascular endothelial cells (PPMEC) | 貨號 | A01X2252 |
肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。它還具有代謝功能，可以執(zhí)行一定的非呼吸功能。在肺損傷中，肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞是活性氧類的重要靶細(xì)胞之一。
在肺炎的發(fā)生過程中，神經(jīng)體液介質(zhì)和氧化劑作用于內(nèi)皮細(xì)胞，使得細(xì)胞間隙滲透性增加，蛋白質(zhì)由血液進入間質(zhì)。細(xì)胞間隙滲透性的增加導(dǎo)致低氧血癥，出現(xiàn)呼吸窘迫綜合征和非心源性肺水腫。
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于實驗動物的正常肺組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD31熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)
產(chǎn)品信息：
英文名稱：Pulmonary microvascular endothelial cells (PPMEC)
組織來源：肺組織
默認(rèn)種屬 豬
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞培養(yǎng)操作：
1. 細(xì)胞復(fù)蘇
運輸與接收：細(xì)胞以液氮凍存形式運輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細(xì)胞瓶，置于超凈臺內(nèi)無菌操作。
復(fù)蘇操作：將細(xì)胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。
2. 細(xì)胞傳代
傳代時機：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%匯合度時進行傳代。
操作步驟：
棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓脫落。
加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細(xì)胞完全脫落。
離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。
按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個T25瓶），補充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。
換液頻率：每2-3天換液一次。
3. 細(xì)胞凍存
凍存液：使用無血清凍存液。
凍存步驟：細(xì)胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉(zhuǎn)入液氮長期保存。
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核心特點：
高度生理相關(guān)性：保留了體內(nèi)來源組織的結(jié)構(gòu)、功能和基因表達(dá)特征。
有限壽命：與無限增殖的腫瘤細(xì)胞系不同，原代細(xì)胞增殖能力有限，經(jīng)過一定次數(shù)的分裂后會進入衰老期，這更符合正常細(xì)胞的生理狀態(tài)。
異質(zhì)性：初始培養(yǎng)物通常是多種細(xì)胞類型的混合物，有時需要通過差速貼壁等方法進行純化。
操作要求高：對培養(yǎng)環(huán)境、試劑質(zhì)量和無菌操作的要求極為嚴(yán)格，培養(yǎng)難度大于永生化細(xì)胞系。
關(guān)鍵字： 豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞;肺組織;貼壁;
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