類胡蘿卜素(carotenoid)含量試劑盒說明書

                                                  分光光度法 50管/48樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義：

類胡蘿卜素是一種脂溶性且具有營養(yǎng)特性的化合物，給植物和動(dòng)物提供天然色素，是重要的抗氧化劑，并有能力轉(zhuǎn)換為必需維生素。類胡蘿卜素可預(yù)防細(xì)胞，組織和基因損毀，增強(qiáng)身體免疫系統(tǒng)，抵御感染，減少癌癥風(fēng)險(xiǎn)，保護(hù)心臟。

測(cè)定原理：

樣品通過混合有機(jī)溶劑萃取，類胡蘿卜素與非類胡蘿卜素成分分離，在448nm處有特征吸收峰。

組成：

自備儀器和用品：

天平、烘箱，100目篩、三角瓶或燒杯、漏斗，紗布、玻璃試管、可見分光光度計(jì)、1 ml玻璃比色皿、正己烷

樣本處理：

提取：稱取0.5g樣本，加入1.5ml試劑一 ，冰浴勻漿，超聲破萃取15min(可改用振蕩金屬浴），15000g 25℃離心5min，取上層液轉(zhuǎn)入10ml離心管中，沉淀用1.5ml試劑一重復(fù)提取2次，并將上層液并入上述10ml離心管中作為提取出的非皂化類胡蘿卜素樣品。

皂化：向上述非皂化類胡蘿卜素樣品中加入2ml試劑二，混勻，25℃室溫避光皂化過夜，皂化完成后，加入3ml試劑三，混勻后，5000g 25℃離心5min，將上層類胡蘿卜素提取相轉(zhuǎn)入5ml離心管，用正己烷定容到5ml，置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟：

注意：空白管只需測(cè)定一次。

計(jì)算公式：

類胡蘿卜素含量（μg/g鮮重）= △A×V樣總÷（ε×d）÷W

 = 31.25×△A÷W

V樣總：最終制備樣品總體積，5ml；ε：類胡蘿卜素消光系數(shù)，0.16；d：比色皿光徑，1cm； W：樣本質(zhì)量，g

注意事項(xiàng)：

1. 提取液易揮發(fā)，有毒性，操作時(shí)做好防護(hù)措施。

2. 測(cè)定必須能迅速，防止揮發(fā)造成誤差。

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