Recombinant Human ARF3
Recombinant Human ARF3（重組人ADP核糖基化因子3）是一種在大腸桿菌或酵母系統(tǒng)中表達(dá)的GTP結(jié)合蛋白，作為小GTP酶家族成員，它主要參與調(diào)控高爾基體內(nèi)的囊泡運輸與膜 trafficking，并與癌癥及神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。
商品介紹：
A-01K101211-50μg | Recombinant Human ARF3 |
A-01K101211-200ug | Recombinant Human ARF3 |
A-01K101211-1mg | Recombinant Human ARF3 |
別稱：ADP ribosylation factor 3, ADP-ribosylation factor 3, ARF3, ARF3_HUMAN, small GTP binding protein
標(biāo)簽：N-terminal His Tag
種屬：Human
宿主：E.Coli
表達(dá)區(qū)間：1-181
分子量：19.8 kDa
Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用：Western Blot, ELISA
性狀：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
純度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
重組蛋白核心優(yōu)勢：
重組蛋白最大的價值在于解決了天然蛋白“獲取難、風(fēng)險高、不穩(wěn)定”的問題。
1. 極高的安全性（生物安全）
杜絕血源性疾?。?許多天然蛋白（如人血白蛋白、凝血因子）過去需從人血或動物組織中提取，存在傳播艾滋病、乙肝、瘋牛病等病毒的風(fēng)險。重組蛋白在非人源或受控的細(xì)胞系統(tǒng)中生產(chǎn)，從源頭上切斷了血源性病原體的傳播途徑。
無動物源成分： 避免了動物源性成分可能引起的免疫排斥或異種病毒感染。
2. 供應(yīng)穩(wěn)定與規(guī)?；o限產(chǎn)能）
擺脫資源限制： 天然蛋白依賴供體（如獻(xiàn)血者、動物器官），供應(yīng)極其不穩(wěn)定。重組蛋白一旦構(gòu)建好工程細(xì)胞株，就像擁有了“永動機”，可以通過發(fā)酵罐無限擴增，不受季節(jié)、地域或供體短缺的影響。
降低成本： 雖然研發(fā)初期投入大，但大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)（如利用大腸桿菌或酵母）能顯著降低單位成本，使藥物更普惠。
3. 質(zhì)量均一與可控（標(biāo)準(zhǔn)化）
批次穩(wěn)定性： 天然提取物常因供體差異導(dǎo)致批次間質(zhì)量波動。重組蛋白由明確的基因序列控制，分子結(jié)構(gòu)單一、均一，批次間差異極小，這對保證藥物療效和科研數(shù)據(jù)的可重復(fù)性至關(guān)重要。
高純度： 配合親和層析等技術(shù)，重組蛋白純度可達(dá)95%甚至99%以上，雜質(zhì)譜明確。
4. 強大的可定制性（分子改造）
功能優(yōu)化： 科學(xué)家可以像搭積木一樣對蛋白進(jìn)行“理性設(shè)計”。例如，通過定點突變提高蛋白活性，或融合Fc片段延長藥物在體內(nèi)的半衰期，甚至添加His/GST標(biāo)簽以便于純化。
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重組蛋白操作注意事項：
1. 溶解與復(fù)溶 (Reconstitution) —— 最關(guān)鍵的第一步
大多數(shù)重組蛋白以凍干粉形式提供，這一步直接決定了蛋白的初始活性。
操作：開蓋前，請務(wù)必在 10,000-12,000 rpm 下離心 30秒（若無高速離心機，3,000-3,500 rpm 離心 5分鐘），將粉末收集至管底，避免損失。
嚴(yán)禁渦旋震蕩 (No Vortexing)：
操作：加入緩沖液后，用移液槍輕輕吹打混勻，或上下顛倒離心管混勻。如果難溶，可置于4℃靜置或水平搖床低速搖動。
溶劑選擇與濃度：
濃度控制：復(fù)溶濃度通常建議不低于 100 μg/mL，以維持蛋白穩(wěn)定性。
pH值：避免使用純水（pH不穩(wěn)定），推薦使用有緩沖能力的溶液（如PBS），除非說明書另有規(guī)定。
2. 儲存與分裝 (Storage & Aliquoting) —— 保持活性的核心
必須添加載體蛋白 (Carrier Protein)：
原因：低濃度的重組蛋白極易吸附在塑料管壁（聚丙烯材質(zhì)）上，導(dǎo)致實際濃度降低。
操作：若需長期保存或稀釋至低濃度（<100 μg/mL），請在緩沖液中加入 0.1% BSA（牛血清白蛋白）、5% HSA（人血清白蛋白）或 5% 海藻糖。載體蛋白能預(yù)先封閉管壁結(jié)合位點，保護(hù)重組蛋白。
注意：若進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)或動物實驗，需確認(rèn)載體蛋白（如BSA）不會干擾實驗結(jié)果，必要時選擇無動物成分的海藻糖。
嚴(yán)禁反復(fù)凍融：
原因：冰晶的形成和融化會破壞蛋白結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致聚集和降解。
操作：復(fù)溶后，務(wù)必分裝 (Aliquot) 成單次使用的小體積（如 10-20 μL），于 -80°C 保存。
溫度控制：
短期（1周內(nèi)）：可置于 2-8°C 保存。
長期：-80°C 是最佳選擇，-20°C 亦可但穩(wěn)定性稍差。
3. 實驗操作細(xì)節(jié) (Handling)
全程低溫：操作過程盡量在冰上進(jìn)行，減少蛋白在室溫下的暴露時間。
防止污染：
使用無菌、無熱原（Low Endotoxin）的槍頭和離心管。
內(nèi)毒素會嚴(yán)重影響細(xì)胞實驗（如誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)），建議內(nèi)毒素水平控制在<1 EU/μg（動物實驗要求 <0.1 EU/μg）。
避免泡沫：吸取或混合時避免產(chǎn)生氣泡，氣液界面可能導(dǎo)致蛋白變性。
關(guān)鍵字： ARF3;Human;E.Coli;
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