Recombinant Human PCBP1

PCBP1是一種多功能核酸結(jié)合蛋白，核心功能是識別并結(jié)合RNA或DNA上的胞嘧啶富集區(qū)（Poly C），從而在轉(zhuǎn)錄、mRNA穩(wěn)定性及翻譯等多個層面調(diào)控基因表達24。特別值得注意的是，PCBP1不僅是RNA剪接調(diào)節(jié)因子，還被證實是細胞內(nèi)的鐵離子分子伴侶，能將二價鐵離子遞送至鐵蛋白進行儲存，或參與含鐵酶的激活，這一機制與阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性疾病密切相關(guān)。重組PCBP1蛋白是研究核酸-蛋白相互作用、鐵代謝穩(wěn)態(tài)及病毒復制機制（如脊髓灰質(zhì)炎病毒）的關(guān)鍵工具。

商品介紹：

別稱：Alpha-CP1, Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein E1, heterogenous nuclear ribonucleoprotein E1, heterogenous nuclear ribonucleoprotein X, hnRNP E1, hnRNP-E1, hnRNP-X, HNRPE1, HNRPX, nucleic acid binding protein sub 2.3, Nucleic acid- binding protein SUB2.3, Nucleic acid-binding protein SUB2.3, PCBP1, PCBP1_HUMAN, poly(rC) binding protein 1, Poly(rC)-binding protein 1, rCbinding protein 1

標簽：N-terminal His Tag

種屬：Human

宿主：E.Coli

表達區(qū)間：1-163

分子量：17.8 kDa

                 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

應用：Western Blot, ELISA

性狀：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

純度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

重組蛋白核心優(yōu)勢：

重組蛋白最大的價值在于解決了天然蛋白“獲取難、風險高、不穩(wěn)定”的問題。

1. 極高的安全性（生物安全）

杜絕血源性疾?。?許多天然蛋白（如人血白蛋白、凝血因子）過去需從人血或動物組織中提取，存在傳播艾滋病、乙肝、瘋牛病等病毒的風險。重組蛋白在非人源或受控的細胞系統(tǒng)中生產(chǎn)，從源頭上切斷了血源性病原體的傳播途徑。

無動物源成分： 避免了動物源性成分可能引起的免疫排斥或異種病毒感染。

2. 供應穩(wěn)定與規(guī)?；o限產(chǎn)能）

擺脫資源限制： 天然蛋白依賴供體（如獻血者、動物器官），供應極其不穩(wěn)定。重組蛋白一旦構(gòu)建好工程細胞株，就像擁有了“永動機”，可以通過發(fā)酵罐無限擴增，不受季節(jié)、地域或供體短缺的影響。

降低成本： 雖然研發(fā)初期投入大，但大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)（如利用大腸桿菌或酵母）能顯著降低單位成本，使藥物更普惠。

3. 質(zhì)量均一與可控（標準化）

批次穩(wěn)定性： 天然提取物常因供體差異導致批次間質(zhì)量波動。重組蛋白由明確的基因序列控制，分子結(jié)構(gòu)單一、均一，批次間差異極小，這對保證藥物療效和科研數(shù)據(jù)的可重復性至關(guān)重要。

高純度： 配合親和層析等技術(shù)，重組蛋白純度可達95%甚至99%以上，雜質(zhì)譜明確。

4. 強大的可定制性（分子改造）

功能優(yōu)化： 科學家可以像搭積木一樣對蛋白進行“理性設(shè)計”。例如，通過定點突變提高蛋白活性，或融合Fc片段延長藥物在體內(nèi)的半衰期，甚至添加His/GST標簽以便于純化。

公司正在出售的產(chǎn)品：

1. 溶解與復溶 (Reconstitution) —— 最關(guān)鍵的第一步

大多數(shù)重組蛋白以凍干粉形式提供，這一步直接決定了蛋白的初始活性。

操作：開蓋前，請務(wù)必在 10,000-12,000 rpm 下離心 30秒（若無高速離心機，3,000-3,500 rpm 離心 5分鐘），將粉末收集至管底，避免損失。

嚴禁渦旋震蕩 (No Vortexing)：

操作：加入緩沖液后，用移液槍輕輕吹打混勻，或上下顛倒離心管混勻。如果難溶，可置于4℃靜置或水平搖床低速搖動。

溶劑選擇與濃度：

濃度控制：復溶濃度通常建議不低于 100 μg/mL，以維持蛋白穩(wěn)定性。

pH值：避免使用純水（pH不穩(wěn)定），推薦使用有緩沖能力的溶液（如PBS），除非說明書另有規(guī)定。

2. 儲存與分裝 (Storage & Aliquoting) —— 保持活性的核心

必須添加載體蛋白 (Carrier Protein)：

原因：低濃度的重組蛋白極易吸附在塑料管壁（聚丙烯材質(zhì)）上，導致實際濃度降低。

操作：若需長期保存或稀釋至低濃度（<100 μg/mL），請在緩沖液中加入 0.1% BSA（牛血清白蛋白）、5% HSA（人血清白蛋白）或 5% 海藻糖。載體蛋白能預先封閉管壁結(jié)合位點，保護重組蛋白。

注意：若進行細胞培養(yǎng)或動物實驗，需確認載體蛋白（如BSA）不會干擾實驗結(jié)果，必要時選擇無動物成分的海藻糖。

嚴禁反復凍融：

原因：冰晶的形成和融化會破壞蛋白結(jié)構(gòu)，導致聚集和降解。

操作：復溶后，務(wù)必分裝 (Aliquot) 成單次使用的小體積（如 10-20 μL），于 -80°C 保存。

溫度控制：

短期（1周內(nèi)）：可置于 2-8°C 保存。

長期：-80°C 是最佳選擇，-20°C 亦可但穩(wěn)定性稍差。

3. 實驗操作細節(jié) (Handling)

全程低溫：操作過程盡量在冰上進行，減少蛋白在室溫下的暴露時間。

防止污染：

使用無菌、無熱原（Low Endotoxin）的槍頭和離心管。

內(nèi)毒素會嚴重影響細胞實驗（如誘導炎癥反應），建議內(nèi)毒素水平控制在<1 EU/μg（動物實驗要求 <0.1 EU/μg）。

避免泡沫：吸取或混合時避免產(chǎn)生氣泡，氣液界面可能導致蛋白變性。