傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)表達純化流程十分依賴人工操作,并且往往需要幾周甚至更久。無細胞蛋白表達的興起可將這一時間縮短至十幾個小時,但是仍需要現(xiàn)進行表達載體的制備,體外擴增和高通量蛋白表達然后再進行篩選等多步操作。Nuclera將這些復(fù)雜的流程集合到eProtein Discovery無細胞蛋白篩選系統(tǒng)。該系統(tǒng)使用基于數(shù)字微流控的智能卡盒、無細胞蛋白質(zhì)合成和熒光蛋白檢測技術(shù),使研究人員更容易大規(guī)模獲取高質(zhì)量蛋白質(zhì)。
只要將目的蛋白的序列輸入配套軟件,就可以利用預(yù)設(shè)融合標(biāo)簽定制DNA構(gòu)建體以優(yōu)化表達,然后將表達載體裝載到機器上,該系統(tǒng)就會通過自動化構(gòu)建篩選(可同時篩24種構(gòu)建體x8種無細胞混合物=192種表達條件),在48小時內(nèi),根據(jù)可溶性、可純化性和純化產(chǎn)量數(shù)據(jù)確定最.佳表達條件,然后放大規(guī)模并獲取蛋白質(zhì)以供下游應(yīng)用。該工作流程僅需3步,可生產(chǎn)18kDa~300kDa的蛋白質(zhì),還更容易地篩選和獲取同源物、直系同源物、突變和異構(gòu)體。
設(shè)計與準(zhǔn)備:將蛋白質(zhì)序列輸入軟件,利用預(yù)設(shè)融合標(biāo)簽設(shè)計構(gòu)建體,并使用eGene制備試劑盒制備表達構(gòu)建體。
表達與純化:自動化篩選192種表達條件以評估可溶性產(chǎn)量,再從其中選取30種進行strep-tag可純化性評估,依據(jù)篩選數(shù)據(jù)確定最.優(yōu)eGene /無細胞混合物組合,整個過程快速效率高,為后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。
放大與應(yīng)用:基于篩選結(jié)果對蛋白質(zhì)進行微克至毫克級別的放大生產(chǎn),最終獲得高純度蛋白質(zhì),滿足不同實驗需求。
未知的藥物靶點
難以表達的蛋白質(zhì)
AI/ML蛋白質(zhì)工程
從頭設(shè)計蛋白質(zhì)
可開發(fā)性評估
上海曼博生物官方提供nuclera的eProtein Discovery無細胞系統(tǒng),為國內(nèi)科研人員、生物醫(yī)藥企業(yè)提供eProtein Discovery系統(tǒng)的產(chǎn)品咨詢、采購安裝、技術(shù)支持等全流程服務(wù),助力國內(nèi)科研機構(gòu)快速開展靶點驗證、膜蛋白表達、AI蛋白設(shè)計和酶的定向進化以及酶工程等相關(guān)研究,如您需要歡迎咨詢!
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