Recombinant Human ZC3H14

商品介紹：

別稱：FLJ11806, Mammalian suppressor of tau pathology-2, MGC26892, MSUT-2, Nuclear protein UKp68, NY REN 37, NYREN 37, Renal carcinoma antigen NY REN 37, Renal carcinoma antigen NY-REN-37, Renal carcinoma antigen NYREN 37, suppressor of tau 2, C. elegans, homolog of, SUT2, UKp68, ZC3H14, ZC3HE_HUMAN, Zinc finger CCCH domain-containing protein 14, Zinc finger CCCH type containing 14

標(biāo)簽：N-terminal His Tag

種屬：Human

宿主：E.Coli

表達(dá)區(qū)間：128-306

分子量：19.6 kDa

                                 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

應(yīng)用：Western Blot, ELISA

性狀：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

純度：Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存儲(chǔ):-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

商品概述：

Recombinant Human ZC3H14 是一種在大腸桿菌中表達(dá)的重組人源蛋白，含有鋅指結(jié)構(gòu)域，主要用于研究其在 mRNA 剪接調(diào)控、環(huán)形 RNA 生成及神經(jīng)發(fā)育中的分子機(jī)制。

重組蛋白的制備流程：

重組蛋白的制備流程主要包括以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟：

1.基因獲?。簭纳矬w中提取目的基因，可通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增特定DNA片段，也可以人工合成基因序列，確保所獲取的基因能編碼目標(biāo)重組蛋白。

2.載體構(gòu)建：將獲取的目的基因與合適的載體連接，常見(jiàn)載體有質(zhì)粒、噬菌體等。載體需具備復(fù)制原點(diǎn)、篩選標(biāo)記等元件，使目的基因能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定復(fù)制和表達(dá)。

3.宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)化：把構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞，如大腸桿菌、酵母細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等。轉(zhuǎn)化方法有化學(xué)轉(zhuǎn)化法、電穿孔法等。

4.篩選與鑒定：運(yùn)用抗生素篩選、PCR鑒定、測(cè)序等方法，挑選出含有重組載體的陽(yáng)性克隆細(xì)胞。

5.蛋白表達(dá)：優(yōu)化培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)陽(yáng)性克隆細(xì)胞表達(dá)重組蛋白。根據(jù)宿主細(xì)胞類型和蛋白特性，調(diào)整溫度、誘導(dǎo)劑濃度等參數(shù)。

6.蛋白純化：采用親和層析、離子交換層析、凝膠過(guò)濾等方法，從細(xì)胞裂解液或培養(yǎng)液中分離純化重組蛋白。

7.質(zhì)量檢測(cè)：對(duì)純化后的重組蛋白進(jìn)行純度、活性、分子量等檢測(cè)，確保其符合質(zhì)量要求。

公司正在出售的產(chǎn)品：

收到產(chǎn)品后的處理：

離心收集：重組蛋白通常以凍干粉形式提供。在運(yùn)輸過(guò)程中，粉末可能會(huì)粘附在管壁或管蓋上。因此，在開(kāi)蓋前，務(wù)必先進(jìn)行短暫離心（例如 10,000-12,000 rpm，30秒），將凍干粉收集于管底。

復(fù)溶操作

選擇合適的溶劑：

仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照推薦的溶劑和濃度進(jìn)行復(fù)溶。

通常使用無(wú)菌的 PBS 緩沖液或低鹽緩沖液（如 10 mM Tris, pH 8.0）。

切勿使用純水，因?yàn)槿狈彌_能力和合適的離子強(qiáng)度可能導(dǎo)致蛋白沉淀或失活。

輕柔混勻：

向凍干粉中加入推薦體積的溶劑，用移液器槍頭輕輕吹打或緩慢上下顛倒混勻。

絕對(duì)禁止渦旋震蕩，因?yàn)閯×业募羟辛?huì)破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致其變性失活。

如果蛋白難以溶解，可將其置于 4℃ 靜置 2 小時(shí)以上或在水平搖床上低速搖晃。

達(dá)到推薦濃度：

初次復(fù)溶時(shí)，建議將蛋白濃度配制在說(shuō)明書(shū)推薦的范圍內(nèi)（通常不低于 100 μg/mL），這有助于維持蛋白的穩(wěn)定性。