基本信息?
產(chǎn)品名稱 | Tli (exo-) DNA Polymerase(5U/ul) | 貨號 | P-PR1280 |
規(guī)格 | 500U | 用途 | 僅供科研 |
?英文名稱?：Tli (exo-) DNA Polymerase (5U/ul)
作用機制：一種缺失3'-5'核酸外切酶活性的嗜熱DNA聚合酶，可在高溫下催化DNA鏈的5'到3'方向合成，無法修復錯配堿基，熱穩(wěn)定性高，適合用于高溫環(huán)境下的DNA合成反應。
適用樣本：單鏈或雙鏈DNA模板，適用于高溫PCR擴增、DNA標記、缺口平移等實驗，尤其適合在較高溫度下進行的反應。
產(chǎn)品概述
該酶是從嗜熱菌Thermococcus litoralis中克隆表達并經(jīng)基因工程改造去除3'-5'外切酶活性的DNA聚合酶，酶活為5U/μl。保留了強大的DNA聚合活性和極端熱穩(wěn)定性，能在高溫環(huán)境下高效催化DNA合成，同時因缺失3'-5'外切酶活性，不會降解DNA片段末端，適合用于DNA測序、引物延伸、突變引入等對DNA末端完整性要求較高的實驗，也可用于PCR擴增，尤其適用于需要高保真度以外的其他特定實驗場景。
產(chǎn)品特點
耐高溫特性：最適反應溫度74℃，95℃仍保持穩(wěn)定活性
鏈置換活性：可高效置換DNA鏈，適用于核酸測序和突變檢測
無3'-5'外切酶活性：不會降解DNA片段末端，保證產(chǎn)物完整性
引物延伸能力：能有效延伸帶有發(fā)夾結(jié)構或復雜二級結(jié)構的引物
操作步驟
.配制反應體系：（以25μl體系為例）
組分 體積
10×反應緩沖液 2.5μl
MgCl?（25mM） 1.5-2.5μl（根據(jù)模板調(diào)整）
dNTPs（10mM each） 0.5μl
上游引物（10μM） 1μl
下游引物（10μM） 1μl
模板DNA 1-5μl
3173 DNA Polymerase 0.2-0.5μl
ddH?O 補至25μl
.PCR擴增：設置循環(huán)參數(shù) 95℃預變性3min；95℃變性30s，50-65℃退火30s，72℃延伸（1min/kb），25-35個循環(huán)；72℃終延伸10min
.產(chǎn)物處理：擴增產(chǎn)物需添加Loading Buffer后進行1%瓊脂糖凝膠電泳
公司正在出售的產(chǎn)品
幼蟲芽孢桿菌PCR試劑盒 | 病毒PCR檢測試劑盒 |
鵝特定基因序列PCR檢測試劑盒 | 血紅蛋白HELISA試劑盒 |
細辛染料法PCR鑒定試劑盒 | B-細胞淋巴瘤因子10ELISA試劑盒 |
哈達爾沙門氏菌PCR檢測試劑盒 | 捻轉(zhuǎn)毛細線蟲PCR試劑盒 |
甲型流感病毒通用探針法法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 豬瘟病毒PCR檢測試劑盒 |
人腺病毒D46型PCR試劑盒 | 豬布魯氏桿菌PCR檢測試劑盒 |
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杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒 | 詹姆士城峽谷病毒RT-PCR試劑盒 |
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三日瘧原蟲PCR試劑盒 | 丙型流感病毒PCR檢測試劑盒 |
副溶血性弧菌PCR檢測試劑盒 | 波氏奧斯特線蟲PCR檢測試劑盒 |
精氨suan脫羧meiELISA試劑盒 | 皺褶青霉PCR試劑盒 |
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矢車菊苷δ1ELISA試劑盒 | Calmin蛋白ELISA試劑盒 |
肽ELISA試劑盒 | Cornulin蛋白ELISA試劑盒 |
注意事項
試劑預處理：使用前需按照瓶身標簽提示，向漂洗液中加入指定體積的無水乙醇
沉淀處理：若裂解液、結(jié)合緩沖液出現(xiàn)沉淀，可在37℃水浴中加熱溶解，搖勻后再使用
操作環(huán)境：實驗需在潔凈環(huán)境中進行，避免樣本交叉污染；所有離心步驟均在室溫下完成
試劑保存：試劑盒未開封時，可在15~25℃干燥環(huán)境下保存12個月；開封后蛋白酶K需置于-20℃保存，避免反復凍融
安全防護：若試劑接觸皮膚或黏膜，需立即用大量自來水沖洗
關鍵字： Tli (exo-) DNA Polym;
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