基本信息?
?中文名稱?:磁珠法通用微生物核酸提取試劑盒 (預裝)
貨號:P-PR1529
規(guī)格:64T
?英文名稱?:Magnetic Bead-based Universal Microbial Nucleic Acid Extraction Kit (Pre-loaded)
作用機制:針對微生物(細菌、真菌等)的細胞壁和細胞膜結構設計裂解液,充分釋放核酸,磁珠特異性結合核酸后,通過洗滌去除雜質,最終獲得純凈的微生物核酸。
適用樣本:糞便、尿液、痰液、環(huán)境樣本等中的微生物樣本。
產品概述
本試劑盒采用磁珠純化技術,可從多種樣本中高效提取包括病毒、支原體、細菌、真菌等在內的微生物核酸。提取過程無需酚氯仿抽提及醇類沉淀,所得核酸純度高、完整性好,可直接用于PCR、qPCR、二代測序等下游實驗。
適用樣本類型:
臨床樣本:全血、血漿、血清、痰液、肺泡灌洗液、腦脊液、宮頸拭子等
環(huán)境樣本:水體、土壤、空氣拭子等
食品樣本:生鮮食品、加工食品表面拭子等
產品特點:
高效裂解:化學法與機械法結合,有效裂解難破壁微生物(如葡萄球菌、真菌)
快速提?。翰《緲颖?/span>35分鐘內完成提取,細菌/真菌樣本40分鐘內完成
自動化兼容:適配主流磁棒式/抽吸式核酸提取儀,支持96孔高通量操作
安全環(huán)保:全程無需接觸有毒試劑,實驗操作更安全
檢驗原理
利用磁珠在高鹽低pH環(huán)境下吸附核酸、低鹽高pH環(huán)境下釋放核酸的特性,通過以下步驟完成純化:
裂解:樣本經裂解液處理后,細胞結構破壞,核酸游離釋放
結合:調節(jié)體系鹽濃度和pH值,使核酸特異性結合到磁珠表面
洗滌:通過洗滌液去除蛋白質、多糖、酶抑制劑等雜質
洗脫:在低鹽高pH條件下,核酸從磁珠表面解離,得到純化核酸
試劑組成(以96人份預裝試劑盒為例)
組分名稱 規(guī)格 功能說明
裂解液 200mL 裂解細胞,釋放核酸
磁珠懸液 10mL 特異性吸附核酸
洗滌液Ⅰ 300mL 去除大部分蛋白質和雜質
洗滌液Ⅱ 300mL 去除鹽離子和殘留小分子雜質
洗脫液 100mL 解離磁珠上的核酸,得到純品
預處理液(可選) 50mL 特殊樣本(如痰液)前處理
預裝說明:所有試劑均預先分裝至對應深孔板,可直接上機使用,無需手動分裝,減少污染風險。
操作步驟
一、手工操作流程
樣本準備
液體樣本:直接取200μL樣本至離心管
拭子樣本:將拭子放入1mL生理鹽水,充分洗脫后取200μL上清
痰液樣本:加入等體積預處理液,渦旋振蕩10分鐘后取200μL
裂解結合
加入200μL裂解液,渦旋混勻,65℃水浴10分鐘
加入10μL磁珠懸液和400μL結合液(含于裂解液體系),充分混勻后室溫靜置5分鐘
將離心管置于磁力架上,吸附磁珠2分鐘,小心吸棄上清
洗滌純化
加入500μL洗滌液Ⅰ,渦旋重懸磁珠,磁力架吸附2分鐘,吸棄上清
加入500μL洗滌液Ⅱ,渦旋重懸磁珠,磁力架吸附2分鐘,吸棄上清
重復洗滌液Ⅱ步驟1次,最后吸棄殘留液體,室溫干燥磁珠3-5分鐘
洗脫核酸
加入50-100μL洗脫液,渦旋重懸磁珠,65℃水浴5分鐘
磁力架吸附2分鐘,將上清轉移至新離心管,即為純化核酸
二、自動化操作流程
將預裝試劑板和樣本板放入核酸提取儀
選擇對應試劑盒的提取程序(儀器自帶或自定義)
啟動程序,全程自動完成裂解、結合、洗滌、洗脫步驟
程序結束后,從洗脫孔收集純化核酸
結果判斷與質量控制
核酸濃度檢測:使用紫外分光光度計檢測,OD???/OD???比值應在1.7-2.0之間
瓊脂糖凝膠電泳:基因組DNA應呈現清晰條帶,無明顯降解
PCR驗證:以內參基因(如16S rRNA)為模板進行擴增,應得到預期條帶
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