基本信息?
?中文名稱(chēng)?：快速DNA提取試劑盒(帶證，煮沸法)
貨號(hào)：P-PR1545
規(guī)格：25T、50T、100T
?英文名稱(chēng)?：Rapid DNA Extraction Kit (Certified, Boiling Method)
作用機(jī)制：基于煮沸法原理，通過(guò)高溫煮沸使細(xì)胞破裂釋放DNA，同時(shí)去除部分蛋白質(zhì)雜質(zhì)，操作快速簡(jiǎn)便，產(chǎn)品帶證，適用于快速檢測(cè)場(chǎng)景。
適用樣本：毛發(fā)、口腔拭子、培養(yǎng)細(xì)胞等樣本，適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)、初步篩查等。
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于煮沸法原理設(shè)計(jì)，可快速?gòu)闹参锝M織、種子、動(dòng)物組織、血液樣品、酵母和細(xì)菌等多種樣本中提取基因組DNA。整個(gè)提取過(guò)程無(wú)需去蛋白、去RNA及其他次生代謝物處理，無(wú)需有機(jī)溶劑抽提和無(wú)水乙醇沉淀，提取的DNA可直接用于后續(xù)PCR擴(kuò)增、基因檢測(cè)等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品組成
組分名稱(chēng) 規(guī)格 作用說(shuō)明
裂解液 按需配置 破碎細(xì)胞，釋放基因組DNA
蛋白酶K（可選） 10mg/ml 降解蛋白質(zhì)，輔助細(xì)胞裂解
RNase A（可選） 10mg/ml 降解樣本中的RNA雜質(zhì)
洗脫緩沖液/無(wú)菌去離子水 按需配置 溶解并洗脫純化后的DNA
離心吸附柱（可選） 按需配置 特異性結(jié)合DNA，實(shí)現(xiàn)快速純化
收集管 按需配置 收集洗脫后的DNA溶液
產(chǎn)品特點(diǎn)
操作簡(jiǎn)單快速：無(wú)需液氮研磨和復(fù)雜的試劑處理，整個(gè)提取過(guò)程僅需5-15分鐘，可快速獲得合格DNA樣本
樣本兼容性廣：適用于植物葉片、種子、動(dòng)物組織、全血、血凝塊、干血斑、酵母、細(xì)菌等多種樣本類(lèi)型
結(jié)果穩(wěn)定可靠：試劑預(yù)混配置，批次間差異小，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性
安全性高：避免接觸苯酚、氯仿等有毒有機(jī)溶劑，保護(hù)操作人員健康
下游適用性強(qiáng)：提取的DNA可直接用于PCR擴(kuò)增、酶切反應(yīng)、基因測(cè)序等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
操作步驟
基礎(chǔ)煮沸法（通用版）
樣本處理：
植物樣本：取10-50mg新鮮組織或5-20mg干樣，研磨成細(xì)粉后轉(zhuǎn)移至離心管
動(dòng)物組織：取10-30mg組織，剪碎后直接加入離心管
血液樣本：取50-200μl全血或血凝塊加入離心管
微生物樣本：取1-5ml菌液，離心收集菌體后棄去上清
裂解反應(yīng)：向離心管中加入200-500μl裂解液，劇烈振蕩混勻，沸水浴5-10分鐘
離心分離：12000rpm離心5分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管
DNA洗脫：取上清液直接用于下游實(shí)驗(yàn)，或加入等體積異丙醇沉淀后，用70%乙醇洗滌，干燥后用洗脫緩沖液溶解
優(yōu)化純化版（帶離心柱）
完成基礎(chǔ)煮沸法步驟1-3，獲得上清液
DNA結(jié)合：向上清液中加入等體積結(jié)合緩沖液，混勻后轉(zhuǎn)移至離心吸附柱，12000rpm離心1分鐘，棄去流出液
雜質(zhì)洗滌：向吸附柱中加入500μl洗滌緩沖液，12000rpm離心30秒，棄去流出液，重復(fù)操作1次
干燥吸附柱：空柱12000rpm離心2分鐘，徹底去除殘留洗滌液
DNA洗脫：向吸附柱中央加入50-100μl洗脫緩沖液，室溫靜置2分鐘后，12000rpm離心2分鐘，收集洗脫液即為純化后的DNA
注意事項(xiàng)
樣本處理：
樣本應(yīng)盡量新鮮，若需保存，應(yīng)置于-80℃低溫環(huán)境，避免反復(fù)凍融
植物樣本研磨應(yīng)盡量充分，以提高DNA提取效率
血液樣本若使用抗凝血，應(yīng)避免使用肝素抗凝劑，以免抑制下游PCR反應(yīng)
操作規(guī)范：
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)穿戴工作服和乳膠手套，避免樣本污染
所有離心步驟建議使用轉(zhuǎn)速≥12000rpm的臺(tái)式離心機(jī)
嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行，避免試劑交叉污染
試劑保存：
試劑盒應(yīng)在室溫（15-25℃）干燥條件下保存，有效期12個(gè)月
蛋白酶K和RNase A需置于-20℃保存，避免反復(fù)凍融
結(jié)果判斷：
提取的DNA可用瓊脂糖凝膠電泳或核酸定量?jī)x檢測(cè)濃度和純度
若DNA純度較低（OD260/OD280<1.6），可增加洗滌步驟或使用RNA酶處理
特殊情況：
富含多糖、多酚的植物樣本，可在裂解液中加入2% PVP（聚乙烯吡咯烷酮）以去除雜質(zhì)
難裂解的細(xì)菌樣本，可在煮沸前加入溶菌酶（10mg/ml）37℃處理30分鐘
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