基本信息?
?中文名稱?：毛囊DNA提取試劑盒
貨號(hào)：P-PR1470
規(guī)格：50T、100T
?英文名稱?：Hair Follicle DNA Extraction Kit
作用機(jī)制：通過(guò)特殊的裂解液消化毛囊中的角質(zhì)蛋白，釋放毛囊細(xì)胞中的DNA，去除雜質(zhì)后得到純凈的DNA，適配毛囊樣本的特殊結(jié)構(gòu)。
適用樣本：人類或動(dòng)物的毛囊樣本。
產(chǎn)品概述
本試劑盒是一款專為從毛囊樣本中提取基因組DNA設(shè)計(jì)的專業(yè)工具，可高效從少量毛囊中獲取高質(zhì)量DNA，滿足基因分析、親子鑒定、法醫(yī)學(xué)鑒定、遺傳疾病篩查等多樣后續(xù)應(yīng)用需求。
試劑盒采用優(yōu)化的酶解體系與純化技術(shù)，針對(duì)性解決毛囊樣本角質(zhì)蛋白多、DNA含量低的提取難點(diǎn)，提取的DNA可直接用于PCR擴(kuò)增、基因測(cè)序、酶切反應(yīng)等下游實(shí)驗(yàn)。
試劑盒組分（以50次反應(yīng)規(guī)格為例）
組分名稱 規(guī)格 作用說(shuō)明
毛囊裂解液（溶液A） 50mL 含特殊去角質(zhì)成分，快速裂解毛囊細(xì)胞，釋放胞內(nèi)DNA，并抑制核酸酶活性
結(jié)合緩沖液（溶液C） 50mL 創(chuàng)造高鹽環(huán)境，促使DNA選擇性吸附于離心柱基質(zhì)膜
漂洗液 50mL 去除吸附在基質(zhì)膜上的蛋白、色素、脂類等雜質(zhì)
洗脫緩沖液 10mL 低鹽環(huán)境下將純凈DNA從基質(zhì)膜上洗脫下來(lái)
蛋白酶K溶液（10mg/mL） 1mL 高效降解毛囊中的角質(zhì)蛋白，助力DNA釋放
還原劑（溶液B） 5mL 破壞毛囊中的二硫鍵，輔助裂解液分解角質(zhì)結(jié)構(gòu)
一次性離心吸附柱 50個(gè) 用于吸附和純化DNA
收集管（2mL） 50個(gè) 配合離心吸附柱使用，收集廢液
注：蛋白酶K需-20℃冷凍保存，其余試劑可室溫避光儲(chǔ)存，有效期12個(gè)月
產(chǎn)品特點(diǎn)
針對(duì)性強(qiáng)：專為毛囊樣本優(yōu)化配方，有效破解角質(zhì)蛋白對(duì)DNA提取的阻礙
高效快速：?jiǎn)蝹€(gè)樣本提取流程最快可在2小時(shí)內(nèi)完成（不含過(guò)夜孵育時(shí)間）
高靈敏度：僅需1-3根帶毛囊的毛發(fā)即可提取滿足PCR需求的DNA
純度優(yōu)異：提取的DNA OD260/OD280比值可達(dá)1.6~1.8，無(wú)PCR抑制物殘留
操作簡(jiǎn)便：柱式純化流程，無(wú)需酚/氯仿抽提，實(shí)驗(yàn)人員易上手
操作步驟
一、樣本預(yù)處理
取1-3根帶有完整毛囊的毛發(fā)（建議從靠近根部2-3mm處剪取）
將毛發(fā)剪至1-2mm小段，轉(zhuǎn)移至干凈的1.5mL離心管中
若樣本量較大，可取30-50mg毛囊組織剪碎后使用
二、毛囊裂解與DNA釋放
向離心管中加入1mL毛囊裂解液，50μL還原劑，20μL蛋白酶K溶液
充分振蕩混勻后，56℃水浴孵育2-4小時(shí)（或37℃過(guò)夜孵育）
期間每隔30分鐘振蕩一次，直至毛囊組織完全裂解（溶液變渾濁）
三、DNA吸附與純化
裂解結(jié)束后，向離心管中加入1mL結(jié)合緩沖液，充分振蕩混勻
將混合液分兩次轉(zhuǎn)移至一次性離心吸附柱中，每次轉(zhuǎn)移后12000rpm離心1分鐘，棄收集管中廢液
向吸附柱中加入500μL漂洗液，12000rpm離心1分鐘，棄廢液
重復(fù)步驟3，再次清洗吸附柱
將吸附柱放回收集管中，12000rpm離心2分鐘，徹底去除殘留漂洗液
四、DNA洗脫與收集
將吸附柱轉(zhuǎn)移至新的1.5mL離心管中
向吸附柱中心位置加入50-100μL洗脫緩沖液（可提前預(yù)熱至65℃）
室溫靜置2分鐘，12000rpm離心1分鐘，離心管中溶液即為提取的純凈DNA
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)操作需在潔凈環(huán)境中進(jìn)行，佩戴手套、口罩，避免樣本交叉污染
蛋白酶K需-20℃保存，使用時(shí)避免反復(fù)凍融，可分裝后使用
還原劑需現(xiàn)用現(xiàn)加，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中失效
若毛囊樣本角質(zhì)化嚴(yán)重，可適當(dāng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間或增加還原劑用量
提取的DNA可置于-20℃長(zhǎng)期保存，短期可在4℃儲(chǔ)存
若需提高DNA產(chǎn)量，可將洗脫液重復(fù)洗脫一次吸附柱
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關(guān)鍵字： 毛囊DNA提取試劑盒;Hair Follicle DNA Ex;
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