試劑基礎(chǔ)物理知識
英文名：AFDye 555 NHS ester；AFDye 555 SE；AFDye 555 Osu；AFDye 555 Succinimidyl Ester
中文名：AFDye 555 活性酯；AFDye 555 琥珀酰亞胺酯
Ex(nm)：555
Em(nm)：565
試劑廠家：西安強化生物
試劑純度：95%
試劑外觀：固體
保存條件：適宜存放于-20℃的干燥、避光、防潮處
試劑簡要介紹
AFDye 555 NHS ester是一種高性能的琥珀酰亞胺酯（NHS ester）活性熒光染料，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)標記、細胞成像、流式細胞術(shù)及生物傳感等實驗室科研領(lǐng)域。
試劑性能特點
NHS 酯的高反應(yīng)活性與選擇性：在pH7.0-9.0的溫和條件下，NHS 酯基團對胺具有高度選擇性，不與巰基、羥基或羧基發(fā)生交叉反應(yīng)。反應(yīng)速率快，偶聯(lián)效率高。
優(yōu)異的光穩(wěn)定性：AFDye 555經(jīng)過化學優(yōu)化，抗光漂白性能顯著優(yōu)于傳統(tǒng)Cy3和TRITC，適合長時間活細胞成像、共聚焦多層掃描及超分辨顯微鏡應(yīng)用。
pH耐受范圍寬：在pH4-10范圍內(nèi)熒光特性保持穩(wěn)定，適用于酸性細胞器或堿性條件下的檢測實驗，不會因環(huán)境pH波動導致顯著的信號漂移。
試劑反應(yīng)機制
親核攻擊：在弱堿性條件下，生物分子上的氨基作為親核試劑進攻NHS酯的羰基碳。
四面體中間體形成：胺基氮原子攻擊羰基碳，形成短暫的四面體中間體。
NHS離去：中間體坍塌，N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）作為離去基團被釋放，同時形成熱力學穩(wěn)定的酰胺鍵。
反應(yīng)動力學：該反應(yīng)為二級親核取代反應(yīng)，在pH8.0左右反應(yīng)速率最快；pH＞9.0時NHS酯基團的水解速率顯著增加，導致標記效率下降。
推薦試劑
AF 647 Acid
Me-tetrazine-Disulfo-Cyanine3
BDP FL tetrazine
BODIPY FL-PEG2-COOH
Nile blue acrylamide
AF 647 azide
triSulfo-Cy5-methyltetrazine
CyOH-TFB-carboxylic acid
BODIPY FL-PEG5-COOH
Cy-G2Ph
BODIPY FL-X,SE
BDP FL NHS ester
AF 647-C5 amine
CyOH (iodine)
AF 647 alkyne
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關(guān)鍵字： AFDye 555 琥珀酰亞胺酯;AFDye 555 NHS ester;；AFDye 555 SE;AFDye 555 Osu;
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