產品概述:
該蛋白全稱為N-Acetyl-D-Glucosamine Kinase,是氨基糖代謝 salvage 途徑中的關鍵酶。其核心功能是催化N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)磷酸化生成N-乙酰葡糖胺-6-磷酸(GlcNAc-6-P),這是回收利用氨基糖以維持細胞內糖基化前體穩(wěn)態(tài)的關鍵步驟。除了在基礎代謝中的作用,NAGK在免疫學領域具有重要意義:最新研究證實,它是NOD2先天免疫受體激活所必需的激酶,能夠特異性地磷酸化細菌肽聚糖碎片(如MDP),生成的磷酸化產物才是NOD2的真正配體,從而連接了糖代謝與細菌感染的免?螜?
產品名稱 | Recombinant Human NAGK | 貨號 | A-01K102690 |
表達區(qū)間 | 1-344 | 分子量 | 37.7 kDa |
規(guī)格 | 50μg、200ug、1mg | 種屬 | Human |
商品介紹:
產品名稱:Recombinant Human NAGK
種屬:Human
宿主:E.Coli
表達區(qū)間:1-344
分子量:37.7 kDa
標簽:N-terminal His Tag
性狀:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
純度:Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用:Western Blot, ELISA
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
別稱:EC 2.7.1.59, GlcNAc kinase, GNK, HSA242910, N acetylglucosamine kinase, N-acetyl-D-glucosamine kinase, N-acetylglucosamine kinase, nagK, NAGK_HUMAN
核心應用:
重組蛋白技術是現代生物技術、醫(yī)學研究和制藥工業(yè)的基石,應用極為廣泛。
生物制藥
這是重組蛋白最核心和價值最高的應用領域。許多過去只能從人或動物體內提取、來源稀少且昂貴的藥物,現在都可以通過重組技術大規(guī)模生產。例如:細胞因子:如促紅素(治療貧血)
干擾素(抗病毒、抗腫瘤)、白細胞介素等。
激素:如重組人胰島素(治療糖尿?。⑷松L激素。
凝血因子:用于治療血友病。
單克隆抗體:已成為腫瘤、自身免疫性疾病等領域最重要的治療藥物之一。
疫苗開發(fā)
重組蛋白疫苗是一種重要的疫苗類型。它通過基因工程在體外細胞中表達病毒的關鍵抗原蛋白(如新冠病毒的RBD蛋白),純化后制成疫苗。這類疫苗不含活病毒,安全性高,
且抗原成分精確、純度高。
科研與診斷
重組蛋白是生命科學研究中不可或缺的工具。
細胞培養(yǎng):作為生長因子、細胞因子等添加劑,用于干細胞誘導、細胞分化等研究。
免疫學研究:作為抗原用于開發(fā)ELISA等免疫檢測試劑盒,或用于產生抗體。
結構與功能研究:幫助科學家研究蛋白質的結構、功能以及細胞信號通路。
重組表達原理:
基因克?。簭呐;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質粒載體。
宿主表達:將重組質粒轉化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產。
蛋白純化:利用His標簽與鎳柱親和層析結合,實現高純度(>95%)蛋白回收,再經透析或凝膠過濾去除雜質。
凍干保存:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復溶后保持天然構象和生物活性。
操作要點:
電泳條件:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
轉膜參數:采用濕轉法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預活化)。
抗體選擇:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
顯色方式:ECL化學發(fā)光法,預期條帶位于~13.4 kDa處。
內參建議:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內參,避免條帶重疊。
公司正在出售的產品:
微管相關絲氨酸/蘇氨酸激酶1 | 細胞脂酰合成酶(ACYL COA SYNTHETASE) |
磷酸化蛋白激酶PKMYT1(Ser83) | 人體Caveolin-1 RFLP基因分析試劑盒 |
載體/DNA產物去磷酸化處理試劑盒 | 環(huán)境銅離子濃度比色法定量酶聯免疫試劑盒 |
血液游離酶連續(xù)循環(huán)比色法定量pcr檢測試劑盒 | 細胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法 |
大鼠腎上腺髓質素(AM)基因重組表達載體(pGEFP-AM) | ZRANB3蛋白抗體 |
PP2A蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 | G蛋白偶聯受體98抗體 |
通用型牛豬綿羊附睪種布魯氏菌(Brucella ovis) | 組織樣品組織G(CATHEPSIN G)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 |
過氧化物酶體生物合成因子10 | DMEM/F12培養(yǎng)基 |
組蛋白乙酰轉移酶MOF | DNA結合抑制因子4抗體 |
pPICZ+目的基因 | 磷酸化整合素β4抗體 |
環(huán)指蛋白138 | Recombinant Human NAGK?錯配修復蛋白2抗體 |
Rho家族GTP酶2 | 小鼠抗人CD14單克隆抗體 |
Recombinant Human XTP4 | Recombinant Human UGDH |
應用建議:
實驗用途: 適用于Western Blot、ELISA等檢測,作為抗原或標準品。
濃度調整: 根據實驗需求稀釋,避免高濃度導致非特異性結合。
安全提示: 操作時需佩戴手套和護目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
關鍵字: NAGK;Human;E.Coli;
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