產(chǎn)品概述：

此重組蛋白通常帶有His等親和標簽，主要用于科學研究。它在細胞能量代謝中扮演著樞紐角色，作為E1亞基（由2個α亞基和2個β亞基組成的異四聚體），負責催化丙酮酸不可逆地脫羧，將其轉化為乙酰輔酶A，從而連接糖酵解與三羧酸（TCA）循環(huán)，是細胞通過氧化磷酸化產(chǎn)生能量的關鍵步驟。該復合體位于線粒體基質(zhì)中，其活性受到嚴格的調(diào)控。

 商品介紹：

產(chǎn)品名稱：Recombinant Human Pyruvate Dehydrogenase E1-alpha subunit

種屬：Human

宿主：E.Coli

表達區(qū)間：30-390

分子量：39.6 kDa

標簽：N-terminal His Tag

性狀：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

純度：Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

應用：Western Blot, ELISA

溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

別稱：ODPA_HUMAN, PDH, PDHA, PDHA1, PDHCE1A, PDHE1 A type I, PDHE1-A type I, PHE1A, Pyruvate Dehydrogenase (lipoamide) alpha 1, Pyruvate dehydrogenase complex, E1 alpha polypeptide 1, Pyruvate Dehydrogenase E1 alpha, Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, somatic form, mitochondrial

核心應用：

重組蛋白技術是現(xiàn)代生物技術、醫(yī)學研究和制藥工業(yè)的基石，應用極為廣泛。

生物制藥

這是重組蛋白最核心和價值最高的應用領域。許多過去只能從人或動物體內(nèi)提取、來源稀少且昂貴的藥物，現(xiàn)在都可以通過重組技術大規(guī)模生產(chǎn)。例如：細胞因子：如促紅素（治療貧血）

干擾素（抗病毒、抗腫瘤）、白細胞介素等。

激素：如重組人胰島素（治療糖尿病）、人生長激素。

凝血因子：用于治療血友病。

單克隆抗體：已成為腫瘤、自身免疫性疾病等領域最重要的治療藥物之一。

疫苗開發(fā)

重組蛋白疫苗是一種重要的疫苗類型。它通過基因工程在體外細胞中表達病毒的關鍵抗原蛋白（如新冠病毒的RBD蛋白），純化后制成疫苗。這類疫苗不含活病毒，安全性高，

且抗原成分精確、純度高。

科研與診斷

重組蛋白是生命科學研究中不可或缺的工具。

細胞培養(yǎng)：作為生長因子、細胞因子等添加劑，用于干細胞誘導、細胞分化等研究。

免疫學研究：作為抗原用于開發(fā)ELISA等免疫檢測試劑盒，或用于產(chǎn)生抗體。

結構與功能研究：幫助科學家研究蛋白質(zhì)的結構、功能以及細胞信號通路。

重組表達原理：

基因克?。簭呐；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對應氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質(zhì)粒載體。

宿主表達：將重組質(zhì)粒轉化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。

蛋白純化：利用His標簽與鎳柱親和層析結合，實現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。

凍干保存：加入海藻糖作為保護劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復溶后保持天然構象和生物活性。

操作要點：

電泳條件：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

轉膜參數(shù)：采用濕轉法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預活化）。

抗體選擇：

一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。

二抗：HRP標記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。

顯色方式：ECL化學發(fā)光法，預期條帶位于~13.4 kDa處。

內(nèi)參建議：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。

公司正在出售的產(chǎn)品：

應用建議:

實驗用途: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標準品。

濃度調(diào)整: 根據(jù)實驗需求稀釋，避免高濃度導致非特異性結合。

安全提示: 操作時需佩戴手套和護目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。