重組蛋白生產(chǎn)流程
通常包括以下幾個核心步驟：
基因克?。菏紫?，科學(xué)家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中，這個載體就像是一個運輸工具，
能將目的基因送入宿主細胞并指導(dǎo)其表達。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細胞中，這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng)：宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化：通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法（如層析技術(shù)），將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
產(chǎn)品概述：
Recombinant Human DIRAS1（重組人DIRAS1蛋白）是一種通過基因重組技術(shù)在體外表達和純化的RAS同源蛋白。該蛋白屬于小GTP酶家族，具有典型的RAS樣G結(jié)構(gòu)域，因其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的獨特調(diào)控作用，特別是與卵巢癌的密切關(guān)聯(lián)，成為癌癥研究中的重要分子。
產(chǎn)品名稱 | Recombinant Human DIRAS1 | 貨號 | A-01K100051 |
表達區(qū)間 | 1-195 | 分子量 | 21.3 kDa |
規(guī)格 | 50μg、200ug、1mg | 種屬 | Human |
商品介紹：
產(chǎn)品名稱：Recombinant Human DIRAS1
種屬：Human
宿主：E.Coli
表達區(qū)間：1-195
分子量：21.3 kDa
Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
標簽：N-terminal His Tag
性狀：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
純度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用：Western Blot, ELISA
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
別稱：Di Ras1, DIRAS family GTP binding RAS like 1, Distinct subgroup of the Ras family member 1, FLJ42681, GBTS1, GTP binding protein Di Ras1, Ras related inhibitor of cell growth, RIG, Rig protein, Small GTP binding tumor suppressor 1
使用前準備：
離心處理
凍干粉在運輸過程中可能附著于管壁或管蓋，開蓋前應(yīng)先進行離心，確保粉末沉降至管底。
建議條件：3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無高速離心機，可適當延長低速離心時間
平衡溫度
將凍干粉緩慢恢復(fù)至室溫（避免加熱加速溶解），防止因溫差導(dǎo)致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解（Reconstitution）
溶解液選擇
推薦使用無菌蒸餾水或 PBS（pH 7.4）進行復(fù)溶
若用于細胞實驗，可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強穩(wěn)定性
配制濃度
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL，此范圍適用于大多數(shù)實驗場景
濃度過高可能導(dǎo)致蛋白聚集，過低則易失活
混勻方式
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次，或上下輕柔顛倒混勻
嚴禁使用渦旋振蕩器，以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致活性喪失
儲存條件：
凍干粉：儲存于-20°C至-80°C，避免反復(fù)凍融。
復(fù)溶后：儲存于2°C至8°C，有效期約1個月；長期存儲建議分裝后置于-20°C至-80°C。
復(fù)溶方法：
離心處理：使用前離心收集凍干粉于管底。
復(fù)溶緩沖液：加入無菌PBS（含0.1% BSA）或去離子水，輕輕吹打混勻，避免渦旋震蕩。
濃度建議：復(fù)溶后蛋白濃度保持在0.1-1.0 mg/mL，分裝保存以減少凍融損傷。
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Recombinant Human HARS | Recombinant Human ATG14L |
應(yīng)用范圍：
免疫研究：體外評估抗病毒或抗菌免疫應(yīng)答，分析炎癥反應(yīng)機制。
細胞培養(yǎng)：添加至細胞培養(yǎng)基中，研究其對巨噬細胞活化的影響。
功能實驗：用于中和實驗或信號通路研究（如JAK-STAT通路）。
關(guān)鍵字： DIRAS1;Human;E.Coli;
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