Recombinant Human ERG說明
商品介紹：
A-01K100446-50μg | Recombinant Human ERG說明 |
A-01K100446-200ug | Recombinant Human ERG說明 |
A-01K100446-1mg | Recombinant Human ERG說明 |
別稱：Avian erythroblastosis virus E-26 (v-ets) oncogene related, D030036I24Rik, Erg, Erg 3, ERG/EWS fusion gene, included, ERG/FUS fusion gene, included, ERG/TMPSSR2 fusion gene, included, ERG_HUMAN, ERG1, included, ERG2, included, ets related, ETS-related gene, KCNH2, Oncogene ERG, p55, TMPRSS2/ERG fusion, Transcriptional regulator ERG, transcriptional regulator ERG (transforming protein ERG)
標簽：N-terminal His Tag
種屬：Human
宿主：E.Coli
表達區(qū)間：290-486
分子量：24.4 KDa
Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用：Western Blot, ELISA
性狀：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in PBS with 5% trehalose, pH7.4
純度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
商品概述：
Recombinant Human ERG（重組人ERG蛋白）是一種通過基因重組技術在體外表達和純化的關鍵轉錄因子。作為ETS（E26轉化特異性）轉錄因子家族的重要成員，ERG在血管生成、造血系統(tǒng)發(fā)育以及腫瘤發(fā)生發(fā)展中扮演著核心角色，尤其因其在前列腺癌中的特異性融合基因而備受關注。
重組蛋白的制備流程：
重組蛋白的制備流程主要包括以下幾個關鍵步驟：
1.基因獲?。簭纳矬w中提取目的基因，可通過PCR技術擴增特定DNA片段，也可以人工合成基因序列，確保所獲取的基因能編碼目標重組蛋白。
2.載體構建：將獲取的目的基因與合適的載體連接，常見載體有質粒、噬菌體等。載體需具備復制原點、篩選標記等元件，使目的基因能在宿主細胞中穩(wěn)定復制和表達。
3.宿主細胞轉化：把構建好的重組載體導入宿主細胞，如大腸桿菌、酵母細胞或哺乳動物細胞等。轉化方法有化學轉化法、電穿孔法等。
4.篩選與鑒定：運用抗生素篩選、PCR鑒定、測序等方法，挑選出含有重組載體的陽性克隆細胞。
5.蛋白表達：優(yōu)化培養(yǎng)條件，誘導陽性克隆細胞表達重組蛋白。根據(jù)宿主細胞類型和蛋白特性，調整溫度、誘導劑濃度等參數(shù)。
6.蛋白純化：采用親和層析、離子交換層析、凝膠過濾等方法，從細胞裂解液或培養(yǎng)液中分離純化重組蛋白。
7.質量檢測：對純化后的重組蛋白進行純度、活性、分子量等檢測，確保其符合質量要求。
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注意事項：
安全提示：僅限研究使用，避免接觸臨床樣本；操作時需佩戴防護裝備。
質量控制：產品純度通過SDS-PAGE驗證，確保生物活性穩(wěn)定；避免使用含硫柳汞等有毒物質的試劑。
兼容性：適用于多種實驗體系，但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結合。
收到產品后的處理：
離心收集：重組蛋白通常以凍干粉形式提供。在運輸過程中，粉末可能會粘附在管壁或管蓋上。因此，在開蓋前，務必先進行短暫離心（例如 10,000-12,000 rpm，30秒），將凍干粉收集于管底。
復溶操作
選擇合適的溶劑：
仔細閱讀產品說明書，嚴格按照推薦的溶劑和濃度進行復溶。
通常使用無菌的 PBS 緩沖液或低鹽緩沖液（如 10 mM Tris, pH 8.0）。
切勿使用純水，因為缺乏緩沖能力和合適的離子強度可能導致蛋白沉淀或失活。
輕柔混勻：
向凍干粉中加入推薦體積的溶劑，用移液器槍頭輕輕吹打或緩慢上下顛倒混勻。
絕對禁止渦旋震蕩，因為劇烈的剪切力會破壞蛋白質的空間結構，導致其變性失活。
如果蛋白難以溶解，可將其置于 4℃ 靜置 2 小時以上或在水平搖床上低速搖晃。
達到推薦濃度：
初次復溶時，建議將蛋白濃度配制在說明書推薦的范圍內（通常不低于 100 μg/mL），這有助于維持蛋白的穩(wěn)定性。
關鍵字： ERG;Human;E.Coli;
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