重組蛋白生產(chǎn)流程
通常包括以下幾個核心步驟:
基因克?。菏紫龋茖W家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運輸工具,
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導入選定的宿主細胞中,這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng):宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化:通過一系列復雜的生物化學方法(如層析技術(shù)),將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
產(chǎn)品概述:
FHL3 僅包含一個N端半LIM結(jié)構(gòu)域和四個完整的LIM結(jié)構(gòu)域,作為一種關(guān)鍵的支架蛋白,它在細胞骨架動力學、轉(zhuǎn)錄調(diào)控及多種信號通路中發(fā)揮核心作用。由于其在肝細胞癌(HCC)、肌肉疾病及血管生成中的雙重角色,重組人 FHL3 已成為癌癥機制研究、藥物篩選及蛋白質(zhì)相互作用分析的重要工具。
產(chǎn)品名稱 | Recombinant Human FHL3說明 | 貨號 | A-01K101504 |
表達區(qū)間 | 1-280 | 分子量 | 51.8 kDa |
規(guī)格 | 50μg、200ug、1mg | 種屬 | Human |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:Recombinant Human FHL3說明
種屬:Human
宿主:E.Coli
表達區(qū)間:1-280
分子量:51.8 kDa

Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
標簽:N-terminal His-IF2DI Tag
性狀:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in PBS with 5% trehalose, pH7.4
純度:Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
應用:Western Blot, ELISA
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
別稱:FHL 3, FHL-3, Fhl3, FHL3_HUMAN, Four and a half LIM domains 3, Four and a half LIM domains protein 3, Skeletal muscle LIM protein 2, Skeletal muscle LIM-protein 2, SLIM-2, SLIM2
使用前準備:
離心處理
凍干粉在運輸過程中可能附著于管壁或管蓋,開蓋前應先進行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無高速離心機,可適當延長低速離心時間
平衡溫度
將凍干粉緩慢恢復至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇
推薦使用無菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進行復溶
若用于細胞實驗,可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強穩(wěn)定性
配制濃度
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL,此范圍適用于大多數(shù)實驗場景
濃度過高可能導致蛋白聚集,過低則易失活
混勻方式
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴禁使用渦旋振蕩器,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導致活性喪失
儲存條件:
凍干粉:儲存于-20°C至-80°C,避免反復凍融。
復溶后:儲存于2°C至8°C,有效期約1個月;長期存儲建議分裝后置于-20°C至-80°C。
復溶方法:
離心處理:使用前離心收集凍干粉于管底。
復溶緩沖液:加入無菌PBS(含0.1% BSA)或去離子水,輕輕吹打混勻,避免渦旋震蕩。
濃度建議:復溶后蛋白濃度保持在0.1-1.0 mg/mL,分裝保存以減少凍融損傷。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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應用范圍:
免疫研究:體外評估抗病毒或抗菌免疫應答,分析炎癥反應機制。
細胞培養(yǎng):添加至細胞培養(yǎng)基中,研究其對巨噬細胞活化的影響。
功能實驗:用于中和實驗或信號通路研究(如JAK-STAT通路)。
關(guān)鍵字: FHL3;Human;E.Coli;
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