商品屬性

產(chǎn)品名稱 | 大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞 | 貨號 | YS-01X7372 |
英文名稱 | Rat Trabecular Meshwork Cells | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 組織來源 | 眼球 |
細(xì)胞簡介

大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞分離自眼球組織;小梁網(wǎng)由角膜基質(zhì)纖維、后界膜和角膜內(nèi)皮向后擴展而成,覆蓋在鞏膜靜脈竇的內(nèi)側(cè)。小梁網(wǎng)細(xì)胞在眼內(nèi)壓調(diào)節(jié)中起著關(guān)鍵作用;小梁網(wǎng)細(xì)胞內(nèi)有特定的神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)肽受體,其中包括腎上腺素、乙酰膽堿和神經(jīng)肽Y。青光眼是由于眼內(nèi)壓力升高而造成的一種不可逆致盲眼病,小梁網(wǎng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)是青光眼病因?qū)W研究的重要手段之一。在小梁網(wǎng)細(xì)胞中,一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)機制,小梁網(wǎng)細(xì)胞可合成不同類型的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白以及金屬蛋白酶。形態(tài)學(xué)觀察可見,剛從組織塊長出的原代細(xì)胞,形態(tài)各異,多數(shù)呈星狀或不規(guī)則形。細(xì)胞有胞突,核橢圓形,胞體肥大,胞漿豐富,且可見吞噬顆粒。隨著細(xì)胞的增生及相互融合為單層,細(xì)胞的形態(tài)趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失,排列緊密呈類似上皮細(xì)胞的扁橢圓形或不規(guī)則形。胞體透亮,包膜清晰。
產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱 大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞
組織來源 眼球
種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介:實驗室分離的大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞采用組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:實驗室分離的大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞經(jīng)NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化酶)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
生物特征

細(xì)胞組成:眼內(nèi)房水引流小梁網(wǎng)特化基質(zhì)細(xì)胞
形態(tài)結(jié)構(gòu):扁平星狀 / 不規(guī)則多邊形,突起相互連接,網(wǎng)狀生長
分子標(biāo)記:TGF-β、MMP9、Vimentin、α-SMA
功能特性:調(diào)控房水引流、維持眼內(nèi)壓穩(wěn)定、參與青光眼病理重塑、胞外基質(zhì)代謝
核心功能

參與房水生成與引流,調(diào)控眼內(nèi)壓平衡
維持眼前節(jié)組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,調(diào)節(jié)房水循環(huán)阻力
吞噬眼內(nèi)代謝碎屑,保持小梁網(wǎng)通路通暢
細(xì)胞功能異??烧T發(fā)眼壓升高,參與青光眼病變
實驗室培養(yǎng)與操作指南

原代細(xì)胞分離方法
采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法:
將組織剪碎至1mm3大小
加入含0.1%Ⅰ型膠原酶和0.25%胰蛋白酶的消化液,37℃振蕩消化60-90分鐘
200目濾網(wǎng)過濾,去除未消化組織
1200rpm離心5分鐘,棄上清液收集細(xì)胞沉淀
用PBS重懸細(xì)胞,接種至培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基:專用細(xì)胞培養(yǎng)基(含10%胎牛血清、1%雙抗、成脂誘導(dǎo)因子)
培養(yǎng)環(huán)境:37℃、5%CO?飽和濕度培養(yǎng)箱
包被處理:培養(yǎng)瓶需經(jīng)多聚賴氨酸(0.1mg/ml)包被,增強細(xì)胞貼壁性
換液頻率:每2-3天更換一次新鮮培養(yǎng)基
傳代操作步驟
吸棄舊培養(yǎng)基,用PBS輕洗細(xì)胞層2次
加入0.25%胰蛋白酶,37℃消化1-3分鐘,顯微鏡下觀察細(xì)胞回縮變圓
加入等體積培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使其脫落
1000rpm離心5分鐘,棄上清后用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞
按1:2或1:3比例接種至新培養(yǎng)瓶
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關(guān)鍵字: 大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞;眼球;梭形、多角形;
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