商品屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠胸腺上皮細(xì)胞 | 貨號(hào) | YS-01X7445 |
英文名稱(chēng) | Rat Thymic Epithelial Cells | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 組織來(lái)源 | 胸腺組織 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介
大鼠胸腺上皮細(xì)胞分離自胸腺組織；胸腺是機(jī)體重要的淋巴器官，其功能與免疫緊密相關(guān)，是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場(chǎng)所，還可以分泌胸腺激素及激素類(lèi)物質(zhì)，具有內(nèi)分泌技能的器官。胸腺上皮細(xì)胞和胸腺細(xì)胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分，其外，胸腺上皮細(xì)胞組成了胸腺細(xì)胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu)，根據(jù)其在胸腺中位置不同，可分為皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞。胸腺細(xì)胞的發(fā)育和成熟是通過(guò)在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細(xì)胞的遷移過(guò)程中相互作用完成的。此外，胸腺細(xì)胞通過(guò)皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陽(yáng)性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陰性選擇發(fā)育為能夠識(shí)別和耐受自身主要組織相容復(fù)合體和自身抗原的成熟T淋巴細(xì)胞。胸腺上皮細(xì)胞是構(gòu)成胸腺微環(huán)境的主要成份，其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達(dá)具有高度異質(zhì)性，與胸腺細(xì)胞結(jié)合成不同類(lèi)型復(fù)合體，部分胸腺上皮細(xì)胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu)。電鏡觀察，可把胸腺上皮細(xì)胞分為3-6型，用抗胸腺上皮細(xì)胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細(xì)胞分為9種類(lèi)型。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) 大鼠胸腺上皮細(xì)胞
組織來(lái)源 胸腺組織
種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胸腺上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胸腺上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠胸腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
生物特征
細(xì)胞組成：胸腺基質(zhì)上皮細(xì)胞，皮質(zhì) + 髓質(zhì)胸腺上皮混合群
形態(tài)結(jié)構(gòu)：多邊形上皮樣，多角形伸展，細(xì)胞間連接廣泛，網(wǎng)狀支持生長(zhǎng)
分子標(biāo)記：CK5、CK8、AIRE、E-cadherin
功能特性：構(gòu)建胸腺微環(huán)境、介導(dǎo) T 細(xì)胞分化發(fā)育、自身抗原呈遞、中樞免疫耐受調(diào)控
核心功能
構(gòu)建胸腺微環(huán)境，支撐淋巴細(xì)胞發(fā)育分化
表達(dá)自身抗原，介導(dǎo) T 細(xì)胞免疫耐受篩選
分泌胸腺激素，調(diào)控淋巴細(xì)胞成熟與分化進(jìn)程
維持胸腺結(jié)構(gòu)完整，調(diào)控中樞免疫發(fā)育穩(wěn)態(tài)
原代細(xì)胞傳代操作指南
傳代時(shí)機(jī)判斷
當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到70%-80%時(shí)進(jìn)行傳代，此時(shí)細(xì)胞活力最佳，避免過(guò)度融合導(dǎo)致接觸抑制
若細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢或形態(tài)變差，可提前傳代調(diào)整密度
具體操作步驟
預(yù)處理：提前預(yù)熱培養(yǎng)基、胰蛋白酶和PBS，準(zhǔn)備好無(wú)菌離心管、移液管等耗材
消化細(xì)胞：吸棄舊培養(yǎng)基，用PBS輕輕沖洗細(xì)胞表面1-2次，去除殘留血清；加入適量胰蛋白酶（覆蓋細(xì)胞表面即可），37℃孵育1-3分鐘，期間在顯微鏡下觀察，待細(xì)胞邊緣收縮、變圓且開(kāi)始脫落時(shí)終止消化
終止消化與收集：加入等量含血清的培養(yǎng)基中和胰蛋白酶，用移液管輕輕吹打培養(yǎng)瓶壁，使細(xì)胞完全脫落形成細(xì)胞懸液；將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管，以1000rpm離心5分鐘
重懸與接種：棄上清，用預(yù)熱的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按1:2-1:3的比例接種至新的培養(yǎng)瓶，補(bǔ)充培養(yǎng)基后輕輕搖勻，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)
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關(guān)鍵字： 大鼠胸腺上皮細(xì)胞;胸腺組織;上皮細(xì)胞樣;
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