人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞是覆蓋在人大隱靜脈血管內(nèi)壁的單層細(xì)胞，參與大隱靜脈血管的張力調(diào)節(jié)、凝血功能維持以及炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)，大隱靜脈是下肢靜脈曲張的好發(fā)部位，研究人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的功能變化對下肢靜脈曲張的發(fā)病機(jī)制研究和治療有重要意義。
產(chǎn)品名稱 人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
英文名稱：Human Great Saphenous Vein Endothelial Cells
貨號：YS-01X7314
組織來源 大隱靜脈組織
種屬 人
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介：實(shí)驗(yàn)室分離的人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：實(shí)驗(yàn)室分離的人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：包被條件PLL（0.1mg/ml）或明膠（0.1%）
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側(cè)端，經(jīng)內(nèi)踝前方，沿小腿內(nèi)側(cè)緣伴隱神經(jīng)上行，經(jīng)股骨內(nèi)側(cè)髁后方，進(jìn)入大腿內(nèi)側(cè)部，與股內(nèi)側(cè)皮神經(jīng)伴行，逐漸向前上，在恥骨結(jié)節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點(diǎn)稱為隱股點(diǎn)。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、陰部外靜脈、股內(nèi)側(cè)淺靜脈和股外側(cè)淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結(jié)扎時(shí)，須分別結(jié)扎、切斷各屬支，以防復(fù)發(fā)。大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞對維持大隱靜脈動(dòng)態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調(diào)節(jié)因子；大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞還釋放控制細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)血管壁緊張度的分子。
細(xì)胞組成：下肢大隱靜脈血管內(nèi)壁內(nèi)皮細(xì)胞
形態(tài)結(jié)構(gòu)：多邊形貼壁生長，靜脈內(nèi)皮特征形態(tài)
分子標(biāo)記：vWF、CD31、VCAM-1 高表達(dá)
功能特性：靜脈屏障、抗血栓、下肢循環(huán)調(diào)節(jié)、靜脈曲張病理參與
構(gòu)成靜脈內(nèi)皮屏障，調(diào)節(jié)下肢靜脈物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)
分泌舒張因子，維持靜脈血管張力與回流功能
抑制血栓與靜脈炎發(fā)生，維持下肢循環(huán)穩(wěn)態(tài)
參與靜脈曲張、靜脈損傷及血管病變進(jìn)程
1.無菌取出組織，預(yù)冷 PBS 反復(fù)沖洗，去除血跡、氣管及雜質(zhì)組織。
2.將組織剪碎至 1mm3 細(xì)小組織塊，PBS 反復(fù)漂洗，去除漂浮雜質(zhì)與死細(xì)胞。
3.加入混合消化液（胰酶 + 膠原酶），37℃水浴消化 20~30min，間斷輕柔吹打；血清培養(yǎng)基加入終止消化。
4.細(xì)胞懸液過 100μm 濾網(wǎng)，收集濾液，300g 離心 5min，棄上清，PBS 重懸洗滌一次。
5.完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，調(diào)整合適密度接種于培養(yǎng)皿；置于 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
6.培養(yǎng) 24h 后首次換液，利用差速貼壁特性：成纖維細(xì)胞貼壁快，去除未貼壁上皮等雜細(xì)胞；之后每 2~3 天換液一次。
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關(guān)鍵字： 人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;大隱靜脈組織;內(nèi)皮細(xì)胞樣;
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