人肝內(nèi)膽管上皮細胞是構(gòu)成肝內(nèi)膽管的主要細胞，參與膽汁分泌、運輸及膽管上皮屏障功能維持。細胞呈立方形或柱狀形態(tài)，表達細胞角蛋白19（CK19）、上皮細胞黏附分子（EpCAM）等標志物。其功能異常與膽管炎、膽汁淤積性肝病、膽管癌等疾病相關(guān)，是研究膽管生理功能、膽汁代謝及膽道疾病藥物研發(fā)的重要工具。
產(chǎn)品名稱 人肝內(nèi)膽管上皮細胞
英文名稱：Human Intrahepatic Bile Duct Epithelial Cells
貨號：YS-01X7168
組織來源 肝臟組織
種屬 人
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介：實驗室分離的人肝內(nèi)膽管上皮細胞采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，接種至預先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中，通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：實驗室分離的人肝內(nèi)膽管上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶人肝內(nèi)膽管上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
人肝內(nèi)膽管上皮細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調(diào)控的分泌和吸收，在保持、調(diào)整和擴大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用，肝內(nèi)膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%，其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。肝內(nèi)膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能，參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程，在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用。研究表明，常見的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病，都是以肝內(nèi)膽管上皮細胞為病變靶位，進而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此，了解正常肝內(nèi)膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義。
細胞組成：肝內(nèi)膽管管壁單層上皮細胞，膽管系統(tǒng)分泌功能細胞
形態(tài)結(jié)構(gòu)：立方形 / 矮柱狀上皮形態(tài)，緊密連接成片生長，胞核圓形居中
分子標記：CK7、CK19、MUC1、SOX9、γ-GT
功能特性：分泌膽汁、調(diào)節(jié)膽管液成分，維持膽管屏障，參與肝內(nèi)膽管炎、膽管結(jié)石、膽管損傷修復
分泌、修飾膽汁，參與膽汁生成、運輸與成分調(diào)節(jié)
形成肝內(nèi)膽管屏障，抵御膽汁刺激與膽道感染
參與膽管損傷修復、膽管組織重塑
異常增殖分化，誘發(fā)肝內(nèi)膽管炎、膽管增生病變
1.取材：新鮮組織（動物 / 臨床），預冷 PBS 沖洗，去除血污、脂肪、包膜。
2.修剪：剪成1 mm3小塊，PBS 洗 3–5 次至澄清。
3.消化：
加 3–5 倍體積0.25% 胰酶，37℃孵育10–20 min，每 5 min 輕搖。
纖維組織換膠原酶，37℃消化 30–60 min。
4.終止：加等體積含血清培養(yǎng)基中和胰酶。
5.過濾：100 μm 篩過濾，棄未消化塊。
6.離心：300–400 g × 5 min，棄上清；PBS 重懸洗滌 1 次。
7.接種：完全培養(yǎng)基重懸，計數(shù)；按1×10?–5×10? cells/cm2接種。
8.培養(yǎng)：37℃、5% CO?；24 h 內(nèi)不動，48–72 h 首次換液。
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