人角膜成纖維細(xì)胞是構(gòu)成角膜基質(zhì)層的主要細(xì)胞，參與角膜的結(jié)構(gòu)維持、損傷修復(fù)和瘢痕形成。細(xì)胞呈成纖維細(xì)胞樣形態(tài)，表達(dá)Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原和α-SMA標(biāo)志物，可分泌細(xì)胞外基質(zhì)維持角膜的透明性和曲率。其異?；罨c角膜瘢痕、角膜炎、角膜營(yíng)養(yǎng)不良等疾病相關(guān)，常用于研究角膜生理病理、損傷修復(fù)機(jī)制及眼科疾病藥物研發(fā)。
產(chǎn)品名稱 人角膜成纖維細(xì)胞
英文名稱：Human Corneal Fibroblast Cells
貨號(hào)：YS-01X7415
組織來(lái)源 眼角膜組織
種屬 人
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液：0.25%胰蛋白酶人角膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
人角膜成纖維細(xì)胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒(méi)有血管，透過(guò)外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。角膜成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持角膜的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。
細(xì)胞組成：角膜基質(zhì)層成纖維細(xì)胞（角膜基質(zhì)細(xì)胞靜息態(tài)）
形態(tài)結(jié)構(gòu)：細(xì)長(zhǎng)梭形，胞體纖細(xì)，排列規(guī)整，胞質(zhì)均勻
分子標(biāo)記：Vimentin、Collagen Ⅰ/Ⅴ、ALDH3A1
功能特性：合成角膜基質(zhì)膠原，維持角膜透明度與力學(xué)結(jié)構(gòu)，參與角膜創(chuàng)傷修復(fù)與瘢痕形成
合成角膜膠原纖維，維持角膜透明度與機(jī)械強(qiáng)度
參與角膜外傷、術(shù)后損傷修復(fù)與基質(zhì)重塑
調(diào)控角膜局部炎癥，緩解外源刺激造成的損傷
平衡角膜基質(zhì)代謝，預(yù)防角膜渾濁、瘢痕增生
1.選取新鮮組織，70%乙醇消毒后無(wú)菌條件下取出顱蓋骨，去除血管及結(jié)締組織，剪成1×1mm的小塊
2.加入2ml 0.25%胰蛋白酶，37℃水浴消化30min，離心去酶，棄上清
3.加入2ml Ⅱ型膠原酶，37℃水浴繼續(xù)消化1h，期間每隔15分鐘輕輕搖晃一次
4.消化結(jié)束后加入預(yù)熱的完全培養(yǎng)基終止消化，用200目濾網(wǎng)過(guò)濾，濾液1500×g離心5分鐘
5.棄上清，用預(yù)熱的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀，接種至提前包被好的培養(yǎng)瓶
6.將培養(yǎng)瓶置于37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
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關(guān)鍵字： 人角膜成纖維細(xì)胞;眼角膜組織;成纖維細(xì)胞樣;
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