人角膜基質(zhì)細(xì)胞是角膜基質(zhì)層的主要細(xì)胞成分,位于膠原纖維板層之間,參與角膜的透明性維持和修復(fù)。細(xì)胞呈星形或扁平形態(tài),表達(dá)Ⅰ型膠原、角膜蛋白聚糖和SOX9標(biāo)志物,可分泌基質(zhì)成分維持角膜的結(jié)構(gòu)和光學(xué)特性。其功能異常與角膜水腫、角膜瘢痕、圓錐角膜等疾病相關(guān),是研究角膜生理病理、角膜修復(fù)及眼科疾病藥物研發(fā)的重要模型。
產(chǎn)品名稱 人角膜基質(zhì)細(xì)胞
英文名稱:Human Corneal Stromal Cells
貨號(hào):YS-01X7572
組織來(lái)源 眼角膜組織
種屬 人
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介:實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜基質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜基質(zhì)細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液:0.25%胰蛋白酶人角膜基質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

人角膜基質(zhì)細(xì)胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,角膜并沒(méi)有血管,透過(guò)外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,占據(jù)角膜厚度的90%,由角膜基質(zhì)細(xì)胞、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整,透明度高的特點(diǎn),正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分,維持角膜的透明度,此細(xì)胞對(duì)于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義。角膜基質(zhì)細(xì)胞,存在于角膜基質(zhì)層中,在正常情況下,處于靜止?fàn)顟B(tài)。但當(dāng)角膜損傷時(shí),不同上皮來(lái)源的因子及環(huán)境信號(hào),將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng),決定著角膜能否完全被修復(fù)。

細(xì)胞組成:角膜固有基質(zhì)特異性間質(zhì)細(xì)胞,角膜穩(wěn)態(tài)關(guān)鍵細(xì)胞
形態(tài)結(jié)構(gòu):靜息態(tài)星狀、胞體小、突起細(xì)長(zhǎng);活化后梭形變纖維樣
分子標(biāo)記:ALDH3A1、Keratocan、Lumican、Vimentin
功能特性:維持角膜基質(zhì)透明性,調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)代謝,損傷后活化參與角膜修復(fù)與纖維化

規(guī)整排列合成基質(zhì)纖維,維持角膜透光性與形態(tài)穩(wěn)定
靜息狀態(tài)維持角膜穩(wěn)態(tài),損傷后活化參與修復(fù)
調(diào)控角膜間質(zhì)代謝,抵御眼部局部炎癥侵襲
異?;罨蓪?dǎo)致角膜瘢痕、散光等眼部病變

1.無(wú)菌環(huán)境下取出新鮮組織,用預(yù)冷PBS快速?zèng)_洗2-3次去除表面血污
2.將組織剪至1mm3大小,直接加入預(yù)熱的膠原酶消化液,37℃恒溫振蕩消化15-20分鐘,期間每隔5分鐘輕輕搖晃
3.消化結(jié)束后立即加入等體積預(yù)熱的完全培養(yǎng)基終止消化,用200目細(xì)胞篩一次性過(guò)濾細(xì)胞懸液
4.無(wú)需離心純化,直接將過(guò)濾后的細(xì)胞懸液接種至提前包被好的培養(yǎng)瓶中
5.放入37℃、5%CO?培養(yǎng)箱培養(yǎng),24小時(shí)后首次半換液(更換一半培養(yǎng)基),去除未貼壁的死細(xì)胞和雜質(zhì)

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關(guān)鍵字: 人角膜基質(zhì)細(xì)胞;眼角膜組織;成纖維細(xì)胞樣;
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