兔氣管平滑肌細(xì)胞位于氣管壁的平滑肌層，通過(guò)收縮與舒張調(diào)節(jié)氣管管徑，從而控制氣道阻力。它的活動(dòng)受神經(jīng)遞質(zhì)（如乙酰膽堿、腎上腺素）、炎癥介質(zhì)及激素的調(diào)節(jié)，是維持呼吸通暢的關(guān)鍵因素。在哮喘、慢性阻塞性肺疾病等氣道疾病中，平滑肌細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)過(guò)度收縮、增殖與表型轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致氣道狹窄與高反應(yīng)性，因此是研究氣道疾病發(fā)病機(jī)制與藥物篩選的核心細(xì)胞模型。
產(chǎn)品名稱(chēng) 兔氣管平滑肌細(xì)胞

英文名稱(chēng)：Rabbit Tracheal Smooth Muscle Cells

貨號(hào)：YS-01X7092

組織來(lái)源 氣管

種屬 兔

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶 - 膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：包被條件

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶兔氣管平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔氣管平滑肌細(xì)胞分離自氣管組織；氣管(Trachea)，呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱(chēng)為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C”字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái)，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開(kāi)狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出，以?xún)艋氲臍怏w。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用；能夠保持氣道張力，維持氣道管狀形態(tài)，從而有利于氣體流通，保持肺部通氣。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)：大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一，其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。

細(xì)胞組成：兔氣管環(huán)行平滑肌層功能細(xì)胞，氣道收縮關(guān)鍵細(xì)胞。

形態(tài)結(jié)構(gòu)：梭形、細(xì)長(zhǎng)紡錘狀，平行束狀排列，具有收縮舒展形態(tài)變化。

分子標(biāo)記：陽(yáng)性：α-SMA、SM22、Desmin。

功能特性：調(diào)控氣管收縮與舒張，調(diào)節(jié)氣道口徑；參與哮喘、氣道高反應(yīng)、氣道痙攣病理機(jī)制。

① 調(diào)控氣管收縮舒張，調(diào)節(jié)氣道管徑與通氣量

② 響應(yīng)神經(jīng)與炎癥介質(zhì)，介導(dǎo)氣道高反應(yīng)性生理病理變化

③ 維持氣管管壁機(jī)械穩(wěn)定性，保障呼吸運(yùn)動(dòng)正常進(jìn)行

④ 參與氣道重塑，助力氣道損傷后組織修復(fù)

1.取材：新鮮組織（動(dòng)物 / 臨床），預(yù)冷 PBS 沖洗，去除血污、脂肪、包膜。

2.修剪：剪成1 mm3小塊，PBS 洗 3–5 次至澄清。

3.消化：

加 3–5 倍體積0.25% 胰酶，37℃孵育10–20 min，每 5 min 輕搖。

纖維組織換膠原酶，37℃消化 30–60 min。

4.終止：加等體積含血清培養(yǎng)基中和胰酶。

5.過(guò)濾：100 μm 篩過(guò)濾，棄未消化塊。

6.離心：300–400 g × 5 min，棄上清；PBS 重懸洗滌 1 次。

7.接種：完全培養(yǎng)基重懸，計(jì)數(shù)；按1×10?–5×10? cells/cm2接種。

8.培養(yǎng)：37℃、5% CO?；24 h 內(nèi)不動(dòng)，48–72 h 首次換液。