商品屬性

細胞簡介

兔腦微血管內皮細胞分離自腦組織；腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分，它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦，大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。與外周內皮細胞相同，大腦微血管內皮細胞表面表達細胞粘附分子，調控白細胞進入大腦。由于微血管內皮細胞的器官特異性，內皮細胞通常取源于疾病研究的相關組織。其主要特征如下：①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接，產生很高的跨內皮阻抗，延遲細胞旁的通量；②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構，其液相物質胞飲水平較低；③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運系統，從而產生“兩極分化”的表現型。
產品信息

產品名稱 兔腦微血管內皮細胞

組織來源 腦組織

種屬 兔
產品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡介：實驗室分離的兔腦微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：實驗室分離的兔腦微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：包被條件PLL（0.1mg/ml）或明膠（0.1%）

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代；不建議多次傳代

消化液：0.25%胰蛋白酶兔腦微血管內皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
生物特征

細胞組成：腦內毛細血管特化內皮細胞，血腦屏障核心功能細胞

形態(tài)結構：小型多角形，致密排列，緊密連接發(fā)達，形態(tài)均一

分子標記：Claudin-5、Occludin、CD31、GLUT1、ZO-1

功能特性：高度選擇性物質轉運；血腦屏障構建；神經毒素、腦部藥物穿透研究

核心功能

1. 血腦屏障核心組分，嚴格管控物質跨腦轉運交換

2. 分泌神經保護因子，維持神經元與腦組織穩(wěn)態(tài)代謝

3. 缺血缺氧易受損，通透性升高誘發(fā)腦水腫損傷

4. 血腦屏障損傷、腦缺血、神經炎癥藥物穿透研究
實驗室培養(yǎng)與操作指南

原代細胞分離方法

采用膠原酶-胰酶聯合消化法：

將組織剪碎至1mm3大小

加入含0.1%Ⅰ型膠原酶和0.25%胰蛋白酶的消化液，37℃振蕩消化60-90分鐘

200目濾網過濾，去除未消化組織

1200rpm離心5分鐘，棄上清液收集細胞沉淀

用PBS重懸細胞，接種至培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基：專用細胞培養(yǎng)基（含10%胎牛血清、1%雙抗、成脂誘導因子）

培養(yǎng)環(huán)境：37℃、5%CO?飽和濕度培養(yǎng)箱

包被處理：培養(yǎng)瓶需經多聚賴氨酸（0.1mg/ml）包被，增強細胞貼壁性

換液頻率：每2-3天更換一次新鮮培養(yǎng)基

傳代操作步驟

吸棄舊培養(yǎng)基，用PBS輕洗細胞層2次

加入0.25%胰蛋白酶，37℃消化1-3分鐘，顯微鏡下觀察細胞回縮變圓

加入等體積培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打細胞使其脫落

1000rpm離心5分鐘，棄上清后用培養(yǎng)基重懸細胞

按1:2或1:3比例接種至新培養(yǎng)瓶

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