商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 貨號(hào) | YS-01X8159 |
英文名稱 | Rabbit Brain Microvascular Endothelial Cells | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 組織來(lái)源 | 腦組織 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介
兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦組織；腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分，它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進(jìn)入大腦，大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在腦血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同，大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子，調(diào)控白細(xì)胞進(jìn)入大腦。由于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的器官特異性，內(nèi)皮細(xì)胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。其主要特征如下：①腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存在許多細(xì)胞間緊密連接，產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗，延遲細(xì)胞旁的通量；②腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu)，其液相物質(zhì)胞飲水平較低；③腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對(duì)稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，從而產(chǎn)生“兩極分化”的表現(xiàn)型。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源 腦組織
種屬 兔
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：包被條件PLL（0.1mg/ml）或明膠（0.1%）
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代；不建議多次傳代
消化液：0.25%胰蛋白酶兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
生物特征
細(xì)胞組成：腦內(nèi)毛細(xì)血管特化內(nèi)皮細(xì)胞，血腦屏障核心功能細(xì)胞
形態(tài)結(jié)構(gòu)：小型多角形，致密排列，緊密連接發(fā)達(dá)，形態(tài)均一
分子標(biāo)記：Claudin-5、Occludin、CD31、GLUT1、ZO-1
功能特性：高度選擇性物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)；血腦屏障構(gòu)建；神經(jīng)毒素、腦部藥物穿透研究
核心功能
1. 血腦屏障核心組分，嚴(yán)格管控物質(zhì)跨腦轉(zhuǎn)運(yùn)交換
2. 分泌神經(jīng)保護(hù)因子，維持神經(jīng)元與腦組織穩(wěn)態(tài)代謝
3. 缺血缺氧易受損，通透性升高誘發(fā)腦水腫損傷
4. 血腦屏障損傷、腦缺血、神經(jīng)炎癥藥物穿透研究
實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)與操作指南
原代細(xì)胞分離方法
采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法：
將組織剪碎至1mm3大小
加入含0.1%Ⅰ型膠原酶和0.25%胰蛋白酶的消化液，37℃振蕩消化60-90分鐘
200目濾網(wǎng)過(guò)濾，去除未消化組織
1200rpm離心5分鐘，棄上清液收集細(xì)胞沉淀
用PBS重懸細(xì)胞，接種至培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：專用細(xì)胞培養(yǎng)基（含10%胎牛血清、1%雙抗、成脂誘導(dǎo)因子）
培養(yǎng)環(huán)境：37℃、5%CO?飽和濕度培養(yǎng)箱
包被處理：培養(yǎng)瓶需經(jīng)多聚賴氨酸（0.1mg/ml）包被，增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性
換液頻率：每2-3天更換一次新鮮培養(yǎng)基
傳代操作步驟
吸棄舊培養(yǎng)基，用PBS輕洗細(xì)胞層2次
加入0.25%胰蛋白酶，37℃消化1-3分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞回縮變圓
加入等體積培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使其脫落
1000rpm離心5分鐘，棄上清后用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞
按1:2或1:3比例接種至新培養(yǎng)瓶
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關(guān)鍵字： 兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞;腦組織;內(nèi)皮細(xì)胞樣;
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