用于定量檢測人樣本中死骨片1(SQSTM1)含量的ELISA試劑盒。SQSTM1又稱p62蛋白,是一種多功能蛋白,參與細(xì)胞內(nèi)的自噬過程、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和抗氧化應(yīng)激反應(yīng),在腫瘤發(fā)生、神經(jīng)退行性疾病等病理過程中發(fā)揮重要作用。試劑盒通常采用雙抗體夾心法,利用特異性抗體識(shí)別樣本中的SQSTM1,通過酶催化底物顯色,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中目標(biāo)蛋白的濃度,可用于自噬機(jī)制研究和相關(guān)疾病的研究。
產(chǎn)品名稱 | 人死骨片1(SQSTM1)elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.15625ng/ml |
英文名稱 | human SQSTM1 elisa kit | 貨號(hào) | PH20472 |
檢測范圍 | 0.3125ng/ml-20ng/ml | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數(shù)據(jù):
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夾心法標(biāo)曲:

核心參數(shù):
檢測原理:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)
種屬反應(yīng)性:僅與人源反應(yīng),無其他種屬交叉反應(yīng)
樣本類型:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清、細(xì)胞裂解液
檢測時(shí)間:全程 3.5–4.5h
保存條件:2–8℃冷藏,禁止冷凍,試劑避光保存
特異性:特異性識(shí)別人 SQSTM1,無同源蛋白交叉反應(yīng)
板內(nèi) / 板間變異系數(shù):板內(nèi) CV<8%,板間 CV<10%
操作步驟:
?試劑準(zhǔn)備?:所有試劑恢復(fù)至室溫(18–25℃),洗滌液如有結(jié)晶需加熱溶解;
?標(biāo)準(zhǔn)品配制?:將凍干標(biāo)準(zhǔn)品用1mL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液溶解,得2000 pg/mL原液,再倍比稀釋成7個(gè)濃度梯度,另設(shè)空白孔(僅稀釋液);
?加樣?:每孔加入50μL樣本或標(biāo)準(zhǔn)品,37℃孵育30–60分鐘;
?洗板?:棄去孔內(nèi)液體,用1×洗滌液洗板5次,拍干;
?加酶標(biāo)抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育1小時(shí);
?洗板?:同上;
?顯色?:每孔加入50μL底物A + 50μL底物B,37℃避光孵育10–30分鐘;
?終止?:每孔加入50μL終止液,顏色由藍(lán)變黃;
?讀數(shù)?:在450 nm波長下用酶標(biāo)儀測定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
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