采用雙抗體夾心法：利用NAT10特異性抗體對(duì)樣本中的N-乙酰轉(zhuǎn)移酶10進(jìn)行定量檢測(cè)。樣本中的NAT10與包被抗體結(jié)合后，再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成免疫復(fù)合物。底物顯色強(qiáng)度與NAT10濃度成正比，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線確定樣本濃度，反映RNA乙?；揎椪{(diào)控狀態(tài)。
產(chǎn)品名稱 | 人N-乙酰轉(zhuǎn)移酶10(NAT10)elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名稱 | human NAT10 elisa kit | 貨號(hào) | PH22650 |
檢測(cè)范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數(shù)據(jù)：
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夾心法標(biāo)曲：
核心參數(shù)：
檢測(cè)原理：雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法，捕獲靶蛋白后酶促顯色定量
種屬反應(yīng)性：專一識(shí)別人源 NAT10，無(wú)跨種屬反應(yīng)
檢測(cè)時(shí)間：2.5~3h
保存條件：2~8℃陰涼密封保存
特異性：僅識(shí)別 NAT10，不和其他乙酰轉(zhuǎn)移酶亞型交叉
板內(nèi)變異系數(shù)：＜8%
操作流程:
加樣
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔：標(biāo)準(zhǔn)品孔加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；樣本孔先加樣本稀釋液40μL，再加待測(cè)樣本10μL（樣本最終稀釋5倍，結(jié)果需乘以5）；空白孔不加任何液體
溫育
除空白孔外，每孔加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃溫育60分鐘
洗板
棄去孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干；每孔加滿洗滌液，靜置1分鐘后棄去，重復(fù)洗板5次；最后一次洗板后需將孔內(nèi)液體徹底拍干
顯色
每孔加入底物液A、B各50μL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘
終止反應(yīng)
每孔加入終止液50μL，此時(shí)藍(lán)色會(huì)立即轉(zhuǎn)為黃色
讀數(shù)
以空白孔調(diào)零，15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm波長(zhǎng)下各孔的吸光度（OD值）
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關(guān)鍵字： 人N-乙酰轉(zhuǎn)移酶10;NAT10;elisa試劑盒;
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