采用雙抗體夾心法：針對HEXA蛋白的特異性表位設計配對抗體。捕獲抗體包被于酶標板，樣本中的HEXA與之結合后，加入HRP標記的檢測抗體。經過孵育、洗滌和底物顯色后，根據(jù)OD值與標準曲線的關系計算樣本中HEXA的含量，反映溶酶體酶活性和泰-薩克斯病相關狀態(tài)。

夾心法數(shù)據(jù)：

以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標準曲線。

夾心法標曲：

核心參數(shù)：

檢測原理：經典雙夾心 ELISA 免疫測定

種屬反應性：人源溶酶體水解酶特異性識別

檢測時間：2.5~3h

保存條件：2~8℃避光存放

特異性：僅識別 HEXA，不與 HEXB 等同工酶交叉

板內變異系數(shù)：＜8%
樣本處理指南:

血清樣本

全血標本室溫放置2小時或4℃過夜

1000×g離心20分鐘，取上清液檢測

暫不檢測的樣本按單次用量分裝，-20℃/-80℃凍存，避免反復凍融

血漿樣本

采用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本

采集后30分鐘內于2-8℃環(huán)境下1000×g離心15分鐘

取上清液檢測，避免使用溶血、高血脂樣本

組織勻漿樣本

預冷PBS（0.01M，pH=7.4）沖洗組織，去除殘留血液

按1:9重量體積比加入PBS（1g組織對應9mL PBS），可添加蛋白酶抑制劑

冰上充分研磨或超聲破碎，5000×g離心5-10分鐘

取上清液檢測

細胞培養(yǎng)上清樣本

1000×g離心20分鐘，去除細胞碎片

取上清液檢測，避免使用含NaN3的樣本（會抑制HRP酶活性）

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