采用雙抗體夾心法：針對hsKL的特異性表位設計配對抗體，通過HRP標記的檢測抗體產(chǎn)生的顯色信號，定量分析樣本中hsKL的含量，反映衰老調(diào)控與鈣磷代謝狀態(tài)。
產(chǎn)品名稱 | 人分泌型Klotho蛋白(hsKL)elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名稱 | human hsKL elisa kit | 貨號 | PH24059 |
檢測范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數(shù)據(jù)：
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標準曲線。
| 校準品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夾心法標曲：
核心參數(shù)：
檢測原理：雙抗體夾心法 ELISA
種屬反應性：僅人
檢測時間：90-110min
保存條件：2-8℃低溫密封
特異性：專一識別人分泌型 Klotho 蛋白
板內(nèi)變異系數(shù)：≤8%
操作步驟:
試劑盒平衡：實驗前20分鐘將試劑盒從冰箱取出，平衡至室溫（20-25℃）
板條準備：從鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條密封放回2-8℃保存
加樣
標準品孔：加入不同濃度標準品50μL（濃度通常為10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL）
樣本孔：先加樣本稀釋液40μL，再加待測樣本10μL（最終稀釋5倍）
空白孔：不加任何液體
加酶標抗體：除空白孔外，每孔加入HRP標記的檢測抗體100μL
溫育：封板膜封板后，37℃溫育60分鐘
洗滌
棄去孔內(nèi)液體，吸水紙上拍干
每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1分鐘后棄去，重復洗板5次
最后一次洗滌后徹底拍干孔內(nèi)液體
顯色：每孔加入顯色劑A、B各50μL，輕輕混勻，37℃避光顯色15分鐘
終止反應：每孔加入終止液50μL，藍色立即轉(zhuǎn)為黃色
讀數(shù)：15分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm波長處測定各孔OD值
公司正在出售的產(chǎn)品：
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關(guān)鍵字： 人分泌型Klotho蛋白;hsKL;elisa試劑盒;
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