產(chǎn)品概述:
人源重組小鼠腎素(Recombinant Mouse Renalase),是一種通過基因工程技術在大腸桿菌(E. coli)或哺乳動物細胞(如HEK293)中表達的高純度活性蛋白。該重組蛋白通常包含全長或催化活性結(jié)構域(如1-342氨基酸),呈高純度(>95%)的無菌凍干粉或液體形式,分子量約為38-45 kDa(依糖基化狀態(tài)而定),緩沖體系多為含甘油或海藻糖的PBS(pH 7.4),旨在用于心血管代謝、腎功能及高血壓機制研究。
產(chǎn)品名稱 | Recombinant Mouse Renalase圖片 | 貨號 | A-01K99768 |
表達區(qū)間 | 18-342 | 分子量 | 35.6 kDa |
規(guī)格 | 50μg、200ug、1mg | 種屬 | Mouse |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:Recombinant Mouse Renalase圖片
種屬:Mouse
宿主:E.Coli
表達區(qū)間:18-342
分子量:35.6 kDa
標簽:N-terminal His Tag
性狀:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
純度:Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用:Western Blot, ELISA
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
別稱:6530404N21Rik, AI452315, AW060440, C10orf59, Chromosome 10 open reading frame 59, FLJ11218, HGNC:25641, Hypothetical protein LOC55328, MAO C, MAO-C, mMAO C, Monoamine oxidase C, Monoamine oxidase-C, Renalase, Renalase FAD dependent amine oxidase, RNLS, RNLS_HUMAN
儲存條件:
凍干粉:儲存于-20°C至-80°C,避免反復凍融。
復溶后:儲存于2°C至8°C,有效期約1個月;長期存儲建議分裝后置于-20°C至-80°C。
復溶方法:
離心處理:使用前離心收集凍干粉于管底。
復溶緩沖液:加入無菌PBS(含0.1% BSA)或去離子水,輕輕吹打混勻,避免渦旋震蕩。
濃度建議:復溶后蛋白濃度保持在0.1-1.0 mg/mL,分裝保存以減少凍融損傷。
重組蛋白的制備流程:
重組蛋白的制備流程主要包括以下幾個關鍵步驟:
1.基因獲?。簭纳矬w中提取目的基因,可通過PCR技術擴增特定DNA片段,
也可以人工合成基因序列,確保所獲取的基因能編碼目標重組蛋白。
2.載體構建:將獲取的目的基因與合適的載體連接,常見載體有質(zhì)粒、噬菌體等。
載體需具備復制原點、篩選標記等元件,使目的基因能在宿主細胞中穩(wěn)定復制和表達。
3.宿主細胞轉(zhuǎn)化:把構建好的重組載體導入宿主細胞,如大腸桿菌、酵母細胞或哺乳動物細胞等。
轉(zhuǎn)化方法有化學轉(zhuǎn)化法、電穿孔法等。
4.篩選與鑒定:運用抗生素篩選、PCR鑒定、測序等方法,挑選出含有重組載體的陽性克隆細胞。
5.蛋白表達:優(yōu)化培養(yǎng)條件,誘導陽性克隆細胞表達重組蛋白。根據(jù)宿主細胞類型和蛋白特性,
調(diào)整溫度、誘導劑濃度等參數(shù)。
6.蛋白純化:采用親和層析、離子交換層析、凝膠過濾等方法從細胞裂解液或培養(yǎng)液中分離純化重組蛋白。
7.質(zhì)量檢測:對純化后的重組蛋白進行純度、活性、分子量等檢測,確保其符合質(zhì)量要求。
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注意事項:
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關鍵字: Renalase;Mouse;E.Coli;
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